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FITC CTB,异硫氰酸荧光素标记霍乱毒素B亚基的制备与质量控制

2025-10-23 分享

产品名称:FITC CTB,异硫氰酸荧光素标记霍乱毒素B亚基的制备与质量控制

制备与质量控制

化学偶联工艺:FITC与CTB的偶联反应需在避光、低温(4℃)条件下进行,通过控制反应时间(通常2-4小时)和pH(7.0-8.0)优化偶联效率。五聚体结构需保持完整,避免解离为单亚基导致结合能力下降。

纯化与表征:通过凝胶过滤色谱去除游离FITC,SDS-PAGE验证偶联产物分子量,荧光分光光度计测定荧光强度,酶联免疫吸附法(ELISA)验证GM1结合活性。

使用规范与注意事项

储存条件:-20℃以下避光保存,避免反复冻融;工作液需现配现用,全程避光操作。

pH敏感性:避免使用pH<6或>8的缓冲液,防止CTB五聚体解离;推荐使用PBS(pH 7.4)或Tris-HCl缓冲液。

浓度优化:活细胞成像建议浓度为10-50 μg/mL(根据细胞类型调整),固定样本可适当提高浓度;流式细胞术需根据仪器灵敏度调整。

共定位兼容性:FITC与红色荧光染料(如Cy3、TRITC)兼容,支持多色成像;避免与pH敏感探针(如pHrodo)混用。

安全性:仅限科研使用,禁止用于人体;操作时需佩戴手套、护目镜,避免直接接触皮肤或吸入。

优势与局限性

优势:

高特异性:仅结合GM1糖脂,背景信号低,适合精准定位。

强荧光信号:FITC亮度适中,光稳定性好,适合长时程成像(如活细胞动态追踪)。

多场景适用:活细胞、固定样本、共聚焦/流式细胞术均可应用,支持三维重建与定量分析。

局限性:

荧光褪色:需使用抗荧光淬灭封片剂(如Vectashield)延缓褪色。

运输速度差异:逆行运输速度(约1-3 mm/天)需根据实验目的调整存活时间。

物种差异:不同物种(如小鼠、大鼠、人)的GM1表达水平及CTB结合亲和力可能存在差异,需预先验证。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

FITC CTB,异硫氰酸荧光素标记霍乱毒素B亚基

关于我们:

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌,良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者,公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器,良好有完备的生产,研发,检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品,公司目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等。


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