生物素标记霍乱毒素B亚基，Biotin CTB的核心原理与结构特性

产品名称：生物素标记霍乱毒素B亚基，Biotin CTB的核心原理与结构特性

核心原理与结构特性

分子组成：霍乱毒素B亚基（CTB）是霍乱毒素（AB₅型毒素）的非毒性部分，由5个相同亚基通过二硫键形成五聚体环状结构，中央疏水孔道特异性结合神经节苷脂GM1（解离常数达纳摩尔级）。生物素通过共价键（如NHS-酯或马来酰亚胺）偶联至CTB的赖氨酸残基，不影响其靶向功能。

生物素-链霉亲和素系统：生物素与链霉亲和素/亲和素结合常数高达10¹⁵ L/mol，较抗原-抗体结合强10⁴倍，实现信号几何级放大，适用于高灵敏度检测与纯化。

实验操作流程

试剂准备：

生物素CTB通常以冻干粉形式提供，需用PBS（含0.2 mg/mL肝素防非特异性结合）或HEPES缓冲液（pH 7.0-7.4）溶解至工作浓度（如400 ng/mL-1 μg/mL）。

避免反复冻融，建议分装后-20℃避光保存。

细胞/组织处理：

活细胞实验：4℃预冷缓冲液清洗细胞，加入生物素CTB工作液，4℃避光孵育30分钟至数小时（依样本类型调整）。

固定与透化：多聚甲醛固定后，Triton X-100透化处理，增强标记效率。

检测与成像：

荧光显微镜（如共聚焦/宽场）、流式细胞术（405 nm激发）或活体成像系统采集信号。

多色实验可联用链霉亲和素-荧光染料（如Streptavidin-Alexa Fluor 488、Cy5），实现多参数分析。

纯化与分离：

生物素标记后，通过链霉亲和素磁珠或凝胶过滤层析纯化目标蛋白，去除未结合生物素。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

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