AF488 Phalloidin,鬼笔环肽-AF488的合成方法与工艺
产品名称:AF488 Phalloidin,鬼笔环肽-AF488的合成方法与工艺
1. 化学结构与核心特性
结构组成:由鬼笔环肽(Phalloidin)与Alexa Fluor 488(AF488)荧光染料偶联而成。Phalloidin是毒蘑菇Amanita phalloides提取的环肽,特异性结合F-actin(丝状肌动蛋白);AF488为绿色荧光染料,激发波长495nm,发射波长518nm,亮度高且光稳定性良好。
结合特性:Phalloidin通过共价键稳定结合F-actin,抑制其解聚,保留微丝动态结构;AF488提供强荧光信号,实现高信噪比成像。
水溶性:溶于DMSO等有机溶剂,需避光、干燥储存。
2. 光学与生物特性
荧光性能:绿色荧光(Ex 495nm/Em 518nm),兼容共聚焦显微镜、流式细胞术及多重荧光成像。与GFP光谱部分重叠,需注意通道串扰。
特异性:仅标记F-actin,不结合G-actin(单体肌动蛋白),确保细胞骨架定位准确。
毒性:Phalloidin对活细胞有毒性,需固定/透化样本后使用;AF488本身低毒,但操作需戴手套、护目镜。
3. 合成方法与工艺
偶联策略:AF488-NHS酯与Phalloidin的氨基反应,在pH 8.3碳酸盐缓冲液中形成稳定酰胺键。反应后通过Sephadex G-25或HPLC纯化,去除游离染料及副产物。
产品形式:通常为冻干粉或DMSO溶液,需分装避光保存,避免反复冻融。
4. 应用领域
细胞生物学:
细胞骨架成像:标记微丝(如应力纤维、伪足),研究细胞迁移、分裂及形态变化。
多重成像:与DAPI(核)、红色荧光蛋白(如mCherry)联用,实现多通道共定位分析。
疾病模型:分析肿瘤细胞、神经元或肌肉组织的肌动蛋白异常(如肌萎缩、癌细胞侵袭)。
材料科学:标记纳米材料表面修饰的肌动蛋白,研究生物-材料相互作用。
诊断开发:用于荧光探针设计,如TaqMan探针、分子信标,辅助基因表达或酶活性检测。
5. 物理与储存条件
溶解性:易溶于DMSO、甲醇;水溶液稳定性低,需现配现用。
储存:-20℃避光保存,DMSO溶液可稳定1年;避免高温、潮湿及光照。
纯度与规格:常见纯度≥95%,规格10mg、25mg等,支持定制。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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