Tide Quencher 3WS琥珀酰亚胺酯,TQ3WS-NHS ester的结构与化学特性
产品名称:Tide Quencher 3WS琥珀酰亚胺酯,TQ3WS-NHS ester的结构与化学特性
1. 结构与化学特性
淬灭核心:TQ3WS属于Tide Quencher系列第三代暗淬灭剂,分子量996.24,激发波长573 nm,吸收光谱覆盖绿-黄光区域(500-600 nm),对TAMRA、TF3、Cy3等荧光团具有高淬灭效率(消光系数>10⁵ M⁻¹cm⁻¹),且自身无自发荧光,信噪比良好。其亲水-疏水双亲结构可与水分子/聚合物链形成氢键,增强荧光信号稳定性。
反应基团:琥珀酰亚胺酯(NHS ester)可与生物分子(如蛋白质、多肽、核酸)的氨基(-NH₂)特异性共价结合,形成稳定酰胺键,适用于固相肽合成及寡核苷酸标记。
物理性质:固体/粉末状,溶于DMSO、DMF等有机溶剂及水,需-20℃以下避光干燥保存,避免反复冻融及水解(NHS酯易水解失效)。
2. 核心应用场景
FRET探针开发:作为淬灭模块与荧光团(如FAM、TAMRA、Cy3)配对构建分子信标、qPCR探针及SNP检测探针。例如,在实时PCR中,靶标核酸杂交会分离荧光团与TQ3WS,解除淬灭,触发荧光信号,实现基因定量或突变检测。
生物标记与成像:通过氨基反应标记抗体、酶或细胞表面受体,应用于免疫荧光(IF)、流式细胞术(FCM)及共聚焦显微镜,追踪分子定位与动态过程;结合近红外染料可实现肿瘤靶向成像及炎症监测。
蛋白质与肽研究:在固相肽合成中作为连接氨基与活性酯的桥梁,促进肽键形成;用于标记半胱氨酸残基(通过马来酰亚胺衍生化),研究蛋白质互作及酶活性。
高灵敏度检测:在分子诊断试剂盒中提升检测灵敏度,如酶联免疫吸附试验(ELISA)或核酸杂交实验,减少背景噪声。
3. 合成与操作要点
合成路径:通过固相肽合成(SPPS)或化学偶联反应,将TQ3WS与NHS酯结合。常用活化剂如EDC/NHS促进酰胺键形成,产物需经HPLC或层析纯化,纯度≥95%。
操作规范:反应体系需避水(pH 7.5-8.5,室温1-2小时),避免强光/高温;生物应用前验证标记物生物相容性及细胞活性;储存需分装小份,惰性气体保护可延长稳定性。
质量控制:通过质谱、核磁共振(¹H-NMR)验证结构,HPLC检测纯度,确保实验可靠性。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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