Biotin-diSulfoCy3-Tyramide，生物素-双磺酸-花菁染料CY3-酪胺的核心原理

Biotin-diSulfoCy3-Tyramide 是一种基于 tyramide signal amplification（TSA，酪胺信号放大）技术的荧光增强试剂，由生物素、双磺酸化花菁染料 Cy3（diSulfoCy3）和酪胺基团组成。该分子设计结合了 Cy3 的明亮橙红荧光特性（激发峰约为 550 nm，发射峰约为 570 nm）与生物素的高亲和性识别能力，同时通过酪胺反应实现高密度信号放大，可显著提升检测灵敏度和图像分辨率。

Tyramide 体系的核心原理是：在辣根过氧化物酶（HRP）催化下，酪胺基团被活化为高反应性的自由基，随后与样品中的酚基或酪氨酸残基发生共价结合，从而将荧光或生物素标签牢固地沉积在靶分子周围。这种放大机制能够将信号局限于目标区域，大幅提高信号强度并降低背景干扰。Biotin-diSulfoCy3-Tyramide 的双磺酸化结构增强了染料的水溶性与生物体系兼容性，使其在细胞和组织样品中扩散均匀且结合稳定。

该试剂兼具生物素与荧光双重功能，既可通过荧光显微镜直接观察 Cy3 发射信号，也可利用链霉亲和素（Streptavidin）或抗生物素抗体进一步放大检测。由于其光谱特性与常用的 TRITC 或 Alexa Fluor 555 相似，Biotin-diSulfoCy3-Tyramide 可在多色荧光实验中作为橙红通道使用，与绿色或远红染料组合进行多重分析。

Biotin-diSulfoCy3-Tyramide 常用于免疫组化（IHC）、免疫荧光（IF）、原位杂交（ISH/FISH）及膜蛋白定位等实验。其显著的信号放大效果尤其适合检测低丰度靶标或微弱表达的蛋白分子。在TSA体系中，该试剂通常与HRP偶联抗体配合使用，通过一步酶促反应即可将标记信号固定于目标区域，获得清晰、稳定且重复性良好的荧光图像。

产品一般以冻干粉或水溶液形式提供，稳定性良好，操作简便。使用时，将样品与HRP标记抗体反应后，再孵育 Biotin-diSulfoCy3-Tyramide，即可实现高效标记。由于Cy3染料具有较好的抗光漂白能力和高量子产率，生成的信号明亮且持久，适合高分辨率显微成像和定量分析。凭借其高灵敏度、低背景及广泛适用性，Biotin-diSulfoCy3-Tyramide 是分子标记、免疫检测和信号放大体系中重要的荧光酪胺试剂。