TAMRA NHS ester的生物应用场景

产品名称：TAMRA NHS ester的生物应用场景

1. 化学结构与性质

分子特征：典型结构为5(6)-TAMRA NHS ester（CAS:150810-69-8），分子式C₃₀H₂₉N₃O₇，分子量约543.6。其核心为罗丹明骨架，通过NHS酯基团（-COO-NHS）实现与生物分子的共价结合。

光谱特性：激发波长532-553 nm，发射波长575 nm，适配532 nm/546 nm激光器（如共聚焦显微镜、流式细胞仪），呈现明亮的橙色荧光。

储存与稳定性：需避光干燥保存于-20°C，避免水解失效；反应需在pH 7-9的碱性条件下进行，常用碳酸氢钠或磷酸盐缓冲液。

2. 反应机制与标记原理

偶联反应：NHS酯基团特异性识别生物分子中的伯胺基团（如蛋白质赖氨酸侧链、氨基修饰的核酸或表面），通过亲核取代形成稳定的酰胺键。反应效率高，通常在室温下1小时内完成。

纯化需求：反应后需通过凝胶过滤（如Sephadex G-25）、透析或HPLC纯化，去除未反应的染料及副产物，避免背景干扰。

3. 生物应用场景

蛋白质与抗体标记：用于制备荧光标记抗体（如免疫荧光、Western blot）、酶联免疫吸附试验（ELISA）及流式细胞术分析。

核酸标记：6-TAMRA异构体常用于标记寡核苷酸、PCR引物或核酸探针，适用于荧光原位杂交（FISH）或实时定量PCR。

肽段与小分子标记：在蛋白质组学中标记合成肽段，研究蛋白质相互作用或细胞内定位；也可用于标记药物分子追踪药代动力学。

表面修饰：与氨基修饰的微球、芯片或生物材料结合，构建荧光生物传感器。

4. 注意事项与优化

异构体选择：5-TAMRA和6-TAMRA异构体在应用中存在差异——5-TAMRA更适合蛋白质标记（信号更稳定），而6-TAMRA在核酸标记中表现更佳（减少HPLC信号拖尾）。

缓冲液兼容性：避免使用含伯胺的缓冲液（如Tris、甘氨酸），推荐使用硼酸盐或碳酸盐缓冲液。

剂量控制：染料与目标分子的摩尔比通常为5-10:1，过量染料可能导致非特异性结合或荧光淬灭。

安全性：虽为研究级试剂，但需遵循实验室安全规范，避免直接接触皮肤或吸入粉尘。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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