Rhodamine X amine，氨基ROX的生物应用场景

产品名称：Rhodamine X amine，氨基ROX的生物应用场景

1. 化学结构与核心特性

分子标识：化学式为C₃₉H₄₅ClN₄O₄，分子量约669.25，属于罗丹明X（Rhodamine X, ROX）的氨基衍生物。其核心为三环罗丹明母核，通过化学修饰引入伯胺（-NH₂）官能团，兼具荧光性能与化学活性。

光谱特性：激发波长578 nm，发射波长604 nm，呈现明亮的橙红色荧光，适配600-650 nm荧光通道（如流式细胞仪、共聚焦显微镜），光稳定性高，量子产率良好，适合长时间成像。

反应机制：氨基基团可与羧酸、活性酯（如NHS ester）、异硫氰酸酯等发生共价偶联，形成稳定的酰胺键、脲键或亚胺键，实现生物分子（蛋白质、核酸、纳米颗粒）的特异性标记。

2. 与TAMRA NHS ester的对比

荧光差异：TAMRA NHS ester激发波长532-553 nm，发射波长575 nm（橙色荧光），而氨基ROX波长更长（红移），适用于不同荧光通道，避免信号串扰。

反应活性：TAMRA通过NHS酯与氨基反应，而氨基ROX通过氨基与羧酸/活性酯反应，两者在标记策略上互补。

应用场景：TAMRA常用于蛋白质/核酸标记、免疫荧光，氨基ROX则更适用于qPCR探针（如TaqMan）、深组织成像及纳米材料修饰，尤其在红光波段具有更好的组织穿透性。

3. 生物应用场景

核酸标记：用于合成荧光定量PCR（qPCR）探针（如TaqMan探针、MGB探针、分子信标），通过与寡核苷酸末端羧基或活性酯偶联，实现基因表达定量分析。

蛋白质工程：标记抗体、酶或细胞表面受体，用于免疫荧光、Western blot、流式细胞术及细胞内定位追踪。

纳米材料修饰：与氨基修饰的微球、量子点或生物材料结合，构建荧光生物传感器或靶向药物载体。

活体成像：红光发射波长适合小动物模型体内成像，减少组织自发荧光干扰，提高成像深度和信噪比。

4. 合成与纯化方法

合成路径：通过罗丹明X母核的官能化引入氨基基团，常见方法包括亲核取代、还原氨基化或硝基化合物还原。反应需精确控制温度、溶剂及催化剂，确保官能团位置特异性。

纯化技术：采用柱层析、高效液相色谱（HPLC）或凝胶过滤去除未反应物和副产物，产物需通过核磁共振（NMR）、质谱（MS）及荧光光谱验证结构与光学性能。

储存条件：需避光干燥保存于-20°C，避免水解失效；反应需在pH 7-9的碱性条件下进行，推荐使用碳酸盐或硼酸盐缓冲液。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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