FITC-ADP，荧光素标记二磷酸腺苷的合成路线原理
FITC-ADP，荧光素标记二磷酸腺苷的合成路线原理
FITC-ADP（Fluorescein Isothiocyanate–ADP）是一种将二磷酸腺苷（ADP, Adenosine Diphosphate）与荧光素异硫氰酸酯（FITC, Fluorescein Isothiocyanate）偶联形成的功能性分子。ADP是细胞内重要的能量代谢中间体，参与ATP/ADP循环及多种酶催化反应。FITC是一种常用的绿色荧光染料，激发波长约490 nm，发射波长约520 nm，通过与ADP共价结合形成FITC-ADP，可在体外或体内实验中实现荧光示踪、酶活性检测和分子相互作用分析。
合成路线原理
FITC含有活性异硫氰酸酯基团（–N=C=S），可与ADP分子中的氨基或经过化学改性引入的氨基形成稳定的硫脲键。ADP分子本身含有腺嘌呤上的氨基或通过5′-位改性可引入反应位点，用于与FITC偶联。反应通常在温和的缓冲液中进行（如碳酸盐或磷酸盐缓冲液，pH 8–9），既保证FITC的活性，又保护ADP的二磷酸结构和化学稳定性。
典型合成步骤
ADP活化或溶液准备
将ADP溶解于适宜缓冲液中，使其分子处于稳定水溶状态。如ADP缺乏直接反应位点，可先通过化学改性在5′-位引入氨基或羟基，以提供FITC偶联的亲核位点。FITC溶解与准备
FITC通常溶解于少量无水DMSO或缓冲液中，避免光照和高温，以保持荧光性能。FITC的异硫氰酸酯基团保持活性，可与ADP的氨基发生共价反应。偶联反应
将FITC缓慢加入ADP溶液中，反应体系轻轻搅拌均匀，反应通常在室温避光条件下进行数小时至过夜。FITC的异硫氰酸酯碳原子被ADP的氨基进攻，形成稳定的硫脲键，实现共价荧光标记。反应监控
可通过荧光光谱或紫外-可见光谱检测FITC特征吸收峰（约490 nm）及荧光发射峰（约520 nm），确认偶联成功。纯化
偶联完成后，可采用透析、超滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的FITC和低分子杂质，获得纯化的FITC-ADP。储存与使用
纯化的FITC-ADP应避光、低温（–20 ℃以下）保存，使用前可根据实验需求稀释，以保证荧光信号稳定及ADP结构完整。
产品名称：FITC-ADP，荧光素标记二磷酸腺苷
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研
产品目录
DSPA
cas:108321-18-2
二硬脂酰磷脂酸
DSPC (18:0 PC)
cas:816-94-4
1，2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱
DSPE
cas:1069-79-0
仅用于科研，不能用于人体。小编axc