Hoechst 33342，赫斯特荧光染料的核心应用场景

产品名称：Hoechst 33342，赫斯特荧光染料的核心应用场景

1. 核心应用场景

活细胞/固定细胞染色：

细胞核成像：荧光显微镜下清晰显示细胞核结构，适用于活细胞动态追踪（如干细胞分化、神经元电活动）及固定细胞保存。

细胞周期分析：流式细胞术定量DNA含量，区分G1/S/G2期（如HeLa细胞G1期荧光强度为S期的50%），评估增殖状态。

凋亡检测：观察凋亡早期核形态变化（染色质浓缩、核碎裂），常与Annexin V联用进行多参数分析。

多重荧光标记：作为蓝色通道（450/50nm滤光片）标记，与FITC、PE等探针联用，实现多色实验（如免疫荧光共定位、肿瘤细胞倍体分析）。

特殊研究场景：干细胞分裂监测、有丝分裂染色体追踪、神经科学中膜电位与DNA含量关联研究。

2. 优势与局限性

优势：

低毒性：活细胞染色工作浓度（5-10 μM）下细胞存活率＞95%，适合长期追踪（如72小时干细胞分化）。

高特异性：DNA结合常数高（约10⁷ M⁻¹），抗核酸酶降解，信号稳定持久（活细胞12小时以上，固定细胞数周）。

快速染色：5-10分钟完成标记，30分钟达峰值强度，无需洗涤步骤。

兼容性：适配流式细胞术、共聚焦显微镜，与Calcein AM等活性染料联用，支持多参数同步分析。

局限性：

光淬灭风险：需避光操作，建议使用抗淬灭封片液或尽快检测。

浓度依赖性：过高浓度（＞20 μM）可能导致荧光饱和，影响定量准确性。

RNA干扰：未处理RNA可致荧光强度高估10-15%，需加RNase A优化。

3. 使用规范与安全

储存条件：-20℃避光干燥保存，有效期1年，避免反复冻融。

操作安全：

防护要求：戴手套、实验服，避免直接接触；人体刺激性物质，需在生物安全柜操作。

浓度优化：活细胞染色推荐5-10 μM，固定细胞可增至10-20 μM；仪器参数需匹配（紫外激光355nm激发，450nm带通滤光片）。

实验流程：

活细胞：直接加入培养基孵育5-10分钟，无需洗涤。

固定细胞：70%乙醇或4%多聚甲醛固定后，染色液孵育10-30分钟，PBS洗涤。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

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