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Su1fo-CY5.5-NHS,水溶性-CY5.5-活性酯的制备方法

2025-11-07 分享

Su1fo-CY5.5-NHS,水溶性-CY5.5-活性酯的制备方法

水溶性-CY5.5-活性酯(sulfo-CY5.5-NHS,花青素-活性酯)是一种远红近红外荧光染料衍生物,属于水溶性花青素类染料,其结构特点在于 CY5.5 共轭荧光骨架、磺酸基提高水溶性以及 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯官能团。激发峰约为 675 纳米,发射峰约为 695 纳米,远红光波段可降低生物样品自发荧光干扰,实现高灵敏度、多色荧光成像。NHS 酯为其提供高度反应活性,可与蛋白质、抗体或多肽中的初级氨基形成稳定酰胺键,实现共价标记和荧光追踪。

sulfo-CY5.5-NHS 的制备方法通常基于羧基活化策略。首先,需要合成水溶性 CY5.5-羧酸衍生物(sulfo-CY5.5-COOH),该分子含有远红荧光骨架和磺酸基团,提高在水相或缓冲体系中的溶解性。羧酸的存在提供了活性位点,可通过 NHS 酯化反应与氨基偶联。

NHS 酯化反应通常在有机溶剂或有机-水混合体系中进行。常用的活化试剂是 N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)或水溶性偶联剂 EDC(1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐),与 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)配合使用。具体步骤为:将 CY5.5-COOH 与 NHS 和 EDC 在缓冲或有机溶剂中混合,生成活性 NHS 酯中间体,反应通常在低温(0~25 摄氏度)下进行,以保证共轭骨架的光学性能不受破坏。磺酸基的存在有助于维持水溶性和离子稳定性,同时减少非特异性副反应。

反应完成后,制备产物需要经过纯化以去除未反应的中间体、游离 NHS 和副产物。常用的纯化方法包括高效液相色谱(HPLC)、凝胶过滤或透析。纯化后的 sulfo-CY5.5-NHS 通常在干燥条件下保存,避免长时间暴露于水相或光照中,以保持活性和荧光稳定性。

制备完成的 sulfo-CY5.5-NHS 具有优异的化学稳定性和水溶性,在中性或弱碱性缓冲液中可保持活性数小时至数天,适用于蛋白质、抗体、核酸或多肽的荧光标记。通过其 NHS 酯官能团,研究者可以在温和条件下实现高选择性共价偶联,构建荧光探针、药物载体或纳米材料标记体系,用于免疫荧光、多色共聚焦成像以及体内外生物分子追踪实验。

产品名称:Su1fo-CY5.5-NHS

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

Su1fo-CY5.5-NHS

产品目录

CY5-PDDA CY5邻苯二甲酸二乙二醇二丙烯酸酯

CY5-PEP-1;花菁染料CY5标记穿膜肽PEP-1

CY5-propofol CY5标记丙泊酚

CY5-ProteinA 蛋白A偶联CY5

CY5-protopanaxatriol CY5标记人参皂苷

CY5-PTD-5;花菁染料CY5标记穿膜肽PTD-5

CY5-PTX CY5紫杉醇

仅用于科研,不能用于人体。小编axc