生物素-磷酰胺基团的应用场景

产品名称：生物素-磷酰胺基团的应用场景

1. 结构特性

核心组成：

生物素（Biotin）：维生素B7，分子量244.31 Da，含咪唑酮环（与链霉亲和素结合的主要部位）和噻吩环（含戊酸侧链，末端羧基可化学修饰），与链霉亲和素/亲和素亲和力较高（解离常数Kd≈10⁻¹⁵ M）。

连接臂：如六碳链（C6）或三乙二醇（TEG），用于减少空间位阻，增强生物素与结合蛋白的相互作用效率。

磷酰胺基团：含活性磷酰胺键，在固相寡核苷酸合成中与核苷酸羟基偶联，形成稳定磷酸二酯键。

保护基团：常含二甲氧基三苯甲基（DMT），用于监测合成效率及反相纯化。

2. 化学性质

反应活性：磷酰胺基团在DNA合成中与寡核苷酸链的5'端、3'端或内部位点发生缩合反应，共价连接生物素分子；DMT保护基支持快速纯化（如RP-HPLC）及吸光度监测。

稳定性：在生理条件下稳定，耐受水溶液及有机溶剂；生物素部分与链霉亲和素结合后形成超稳定复合物，抗酶解能力强。

溶解性：溶于水、DMSO、DMF等极性溶剂，-20℃避光干燥保存，避免反复冻融。

3. 应用场景

生物分子标记：

寡核苷酸标记：合成5'-生物素化引物/探针，用于PCR扩增、基因构建、原位杂交及核酸分离；通过链霉亲和素磁珠捕获目标序列，实现信号放大（如ELISA、Western Blot）。

蛋白质标记：生物素化DNA探针用于检测特定蛋白质，或结合荧光染料（如TAMRA、Cy5）构建多功能探针。

药物递送：生物素作为配体与脂质体、胶束、纳米粒等载体相连，利用肿瘤细胞表面过表达的生物素受体实现靶向递药，减少脱靶毒性。

生物正交反应：磷酰胺基团可与叠氮基团或炔基反应（如CuAAC或SPAAC），用于生物正交标记、活细胞成像及分子追踪。

4. 研究进展

合成技术：通过固相合成法将生物素-磷酰胺基团精准引入DNA/RNA链末端或内部，如5'-Biotin Phosphoramidite在DNA合成仪中自动化安装生物素“抓手”。

功能扩展：结合聚乙二醇（PEG）或荧光基团（如FAM、Cy3）构建多功能探针，用于高通量筛选、生物传感器及电化学检测。

生物体内行为：生物素标记聚合物通过受体介导内吞进入细胞，影响蛋白质活性、细胞信号转导及新陈代谢；生物相容性好的聚合物在体内保持稳定，减少降解排斥。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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