iFluor 350 酪胺，iFluor 350 Styramide的应用场景与案例

产品名称：iFluor 350 酪胺，iFluor 350 Styramide的应用场景与案例

应用场景与案例

免疫组化（IHC）：

肿瘤标志物检测：如PD-L1、HER2在乳腺癌、肺癌中的表达分析，通过TSA技术提高检测灵敏度。

细胞凋亡检测：与Annexin V结合，标记凋亡细胞膜外侧的磷脂酰丝氨酸（PS），适配流式细胞术或荧光显微镜。

免疫荧光（IF）：

细胞骨架追踪：标记鬼笔环肽（Phalloidin）检测F-actin动态变化。

细胞器定位：如线粒体、内质网的荧光标记，结合共聚焦显微镜观察亚细胞结构。

原位杂交（ISH）：

低丰度核酸检测：标记mRNA或DNA探针，用于基因表达分析或病毒检测。

多重荧光杂交：与Cyanine 5.5、ATTO 550等染料协同，实现多靶标同时检测。

材料科学：

纳米颗粒标记：嵌入量子点或脂质体，增强生物相容性与靶向性。

生物传感器：用于表面修饰，提升检测灵敏度（如葡萄糖传感器）。

合成与使用规范

合成路径：

偶联反应：iFluor 350 NHS酯与酪胺在碱性缓冲液中反应，形成稳定的酰胺键。

纯化方法：通过凝胶过滤（如Sephadex G-25）或透析去除游离染料，HPLC验证纯度。

操作步骤：

样本处理：4%多聚甲醛固定细胞/组织，0.1%-0.5% Triton X-100透化。

封闭：5% BSA或脱脂牛奶封闭非特异性结合位点。

抗体孵育：一抗（4℃过夜）→ HRP标记二抗（室温30-60分钟）。

TSA反应：iFluor 350酪胺稀释后滴加，避光反应5-10分钟，H₂O₂催化信号沉积。

信号检测：荧光显微镜或流式细胞仪采集图像，DAPI复染细胞核。

技术挑战与解决方案

挑战：

光漂白：长时间曝光可能导致荧光衰减，需优化激发光强度与曝光时间。

非特异性结合：高浓度试剂或不当封闭可能增加背景噪声，需优化抗体浓度与封闭条件。

储存稳定性：反复冻融或高温可能降解染料，需严格遵循储存规范。

解决方案：

实验优化：通过预实验确定*佳抗体稀释度、反应时间及染料浓度。

对照设置：使用阴性/阳性对照验证实验特异性。

仪器校准：定期校准荧光显微镜或流式细胞仪，确保信号准确性。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

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