AF 700 NHS Ester，AF700 琥珀酰亚胺酯的化学性质

产品名称：AF 700 NHS Ester，AF700 琥珀酰亚胺酯的化学性质

1. 结构特性

荧光核心：基于Alexa Fluor 700染料，激发波长696–702 nm，发射波长719–723 nm（近红外区），具有高量子产率（约0.3–0.5）和良好的光稳定性，可穿透深层组织并降低背景荧光干扰。

反应基团：NHS酯（N-羟基琥珀酰亚胺酯）特异性识别生物分子中的伯胺基团（-NH₂），形成稳定酰胺键，确保标记特异性。

分子参数：分子量约1400 g/mol，水溶性良好（pH 4–10稳定），溶于DMSO、DMF等有机溶剂，需避光干燥保存。

2. 化学性质

反应条件：在pH 7.5–8.5的弱碱性缓冲液（如PBS）中，室温或4°C反应2小时至过夜，避免含氨基的缓冲液（如Tris）干扰。NHS酯对水解敏感，溶液需现用现配。

稳定性：在pH 4–10范围内荧光性质稳定，-20°C避光保存可维持活性数月至数年。高温或长时间暴露会导致荧光衰减或染料降解。

特异性：主要靶向伯胺基团，需确保目标分子（如蛋白质、抗体、胺修饰核酸）的伯胺处于还原状态，避免竞争性结合。

3. 应用场景

生物标记：广泛用于抗体、蛋白质、肽段、胺修饰的寡核苷酸及纳米颗粒的荧光标记，适用于流式细胞术、共聚焦显微镜、超分辨率成像（如STED、PALM）、荧光原位杂交（FISH）等。

活体成像：近红外特性（发射波长719–723 nm）适合深层组织成像、肿瘤定位、药物递送追踪及活体动物模型研究，穿透力强且背景干扰低。

多色标记：与FITC、PE、Cy5、AF647等染料联用，实现多通道荧光检测（如流式细胞术多参数分析），互不干扰且信噪比高。

技术扩展：可用于构建荧光共振能量转移（FRET）系统、生物传感器及纳米材料功能化标记。

4. 反应条件优化

缓冲液选择：推荐PBS pH 7.5–8.5，避免含氨基或巯基的缓冲液（如Tris、DTT）干扰NHS酯反应。

温度与时间：室温（20–25°C）或4°C反应，时间根据蛋白浓度调整（通常2小时至过夜），避免高温引发副反应。

纯化步骤：反应后需通过透析、凝胶过滤或层析去除未反应的染料，确保标记分子纯度与稳定性。

染料比例：优化染料与蛋白的摩尔比（通常1:1至10:1），避免过度标记影响生物分子功能。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

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