AF594 Picolyl Azide,AF594吡啶甲基叠氮的应用场景
产品名称:AF594 Picolyl Azide,AF594吡啶甲基叠氮的应用场景
1. 结构特性
荧光核心:基于Alexa Fluor 594染料,激发波长约590 nm,发射波长约617 nm,发出明亮的橙红色荧光,量子产率高且光稳定性良好,适合长时间成像。
反应基团:吡啶甲基叠氮(-N₃)基团通过铜催化的叠氮-炔环加成反应(CuAAC)与炔烃(如DBCO、BCN)高效共价结合,实现特异性标记。吡啶环增强水溶性及金属配位能力,适用于靶向需求。
分子参数:分子量约842.98,纯度≥95%,溶于DMSO/DMF等有机溶剂,需避光干燥保存。
2. 化学性质
反应活性:叠氮基团通过CuAAC反应与炔烃形成稳定三唑键,吡啶环的螯合作用加速反应(速度提升40倍),铜浓度需求降低至常规1/10,减少毒性。
稳定性:pH 2–10范围内稳定,光稳定性高,-20°C避光保存可维持活性数年。
特异性:主要靶向炔基修饰的生物分子(如蛋白质、核酸),避免非特异性结合,适合活细胞/固定细胞标记。
3. 应用场景
生物标记:标记抗体、蛋白质、肽段、核酸(如炔基修饰的寡核苷酸)及纳米颗粒,用于流式细胞术、共聚焦显微镜、超分辨成像(STED/PALM)、荧光原位杂交(FISH)等。
活体成像:橙红色荧光穿透力强,适合深层组织成像、肿瘤定位及药物递送追踪,背景干扰低。
多色标记:与FITC、AF647等染料联用,实现多通道检测(如流式细胞术多参数分析),互不干扰。
技术扩展:用于构建生物传感器、纳米材料功能化标记及细胞动态过程追踪(如蛋白质相互作用、代谢标记)。
4. 反应条件优化
缓冲液选择:推荐PBS pH 7.0–8.0,避免含氨基/巯基的缓冲液干扰。
温度与时间:室温或4°C反应30分钟至2小时,避免高温引发副反应。
纯化步骤:反应后需通过透析、凝胶过滤或层析去除未反应染料,确保标记分子纯度。
铜配体应用:使用BTTAA等配体可进一步降低铜毒性,提升反应效率。
染料比例:优化染料与蛋白摩尔比(1:1至10:1),避免过度标记影响生物活性。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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