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AlexaFluor488 Tyramide,AF488酪胺的合成与制备

2025-11-14 分享

产品名称:AlexaFluor488 Tyramide,AF488酪胺的合成与制备

1. 结构与荧光特性

荧光核心:基于Alexa Fluor 488染料(激发波长499 nm,发射波长520 nm),呈现绿色荧光,量子产率高、光稳定性强,兼容FITC滤波片组,适合多色成像(如与DAPI、AF568、AF647联用)。

酪胺功能基团:含酚羟基和伯胺基,通过辣根过氧化物酶(HRP)催化氧化生成自由基,与蛋白质/核酸的酪氨酸残基共价结合,实现信号定点沉积与放大。

分子量:约856.02,溶于DMSO、水及PBS,水溶性良好,减少非特异性吸附。

2. 合成与制备

合成路径:通过NHS酯活化Alexa Fluor 488的羧基,与酪胺在碱性条件下偶联,经HPLC纯化,质谱/光谱验证结构。或采用点击化学(如CuAAC)实现模块化偶联,确保荧光团与酪胺的稳定共价结合。

关键步骤:

配制母液:溶于无水DMSO至10–20 mM浓度,分装小份冷冻保存。

偶联反应:与NHS酯按1:10–20摩尔比混合,室温避光反应2小时或4℃过夜;与醛基反应生成希夫碱后,用NaBH₄还原稳定。

纯化:通过凝胶过滤层析或透析去除游离杂质,确保纯度≥95%。

3. 核心应用场景

免疫组化/荧光成像:在HRP催化下,通过酪胺信号放大(TSA)技术检测低丰度靶标(如肿瘤标志物、细胞表面蛋白),信号强度提升10-100倍,信噪比显著优于传统方法。

多色成像与流式分析:兼容TRITC/Cy3通道,支持10色以上超多重荧光成像(结合光谱解混技术),适用于细胞动态追踪、组织切片染色及活细胞实验。

超分辨显微镜:在STORM/SIM技术中作为荧光探针,提升成像分辨率至纳米级。

分子探针与生物传感器:标记抗体、核酸探针,用于基因表达分析、信号通路研究、疾病诊断(如心肌肌钙蛋白检测)。

特殊应用:活细胞TSA技术、体内成像及药物递送系统开发。

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

AlexaFluor488 Tyramide,AF488酪胺

关于我们:

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌,良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者,公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器,良好有完备的生产,研发,检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品,公司目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等。


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