DY430-X tyramide,DY430-氨基己酰酪胺的作用原理与信号放大
产品名称:DY430-X tyramide,DY430-氨基己酰酪胺的作用原理与信号放大
1. 核心结构与化学特性
分子结构:化学式为C₃₃H₄₁N₃O₈S,分子量639.76。由DY430荧光团(如香豆素衍生物)与酪胺通过氨基己酸连接,形成活性酯结构。外观为深红色固体粉末或紫色结晶颗粒,纯度≥95%。
荧光特性:激发波长约490nm,发射波长约515nm(绿色荧光),具有高荧光强度、光稳定性及热稳定性,适用于多种检测平台。
反应机制:通过辣根过氧化物酶(HRP)催化,在靶标区域共价沉积荧光标记物,实现信号级联放大,灵敏度远超传统直接标记法。
2. 作用原理与信号放大
酪胺信号放大系统(TSATM):DY430-X tyramide作为HRP底物,在酶催化下生成自由基,与靶标分子(如抗体、核酸探针)结合,形成高密度荧光沉积,增强信号强度。
特异性沉积:仅在靶标区域发生反应,背景干扰低,适用于低丰度靶标(如低表达蛋白、微量核酸)的检测。
3. 生物医学应用
免疫组织化学(IHC):标记抗体用于组织切片中蛋白质的定位与定量,如肿瘤标志物检测。
原位杂交与核酸分析:标记核酸探针,实现RNA/单链DNA的精确定位与可视化。
细胞染色与流式细胞术:用于细胞表面受体、细胞内分子的荧光标记,支持多色兼容分析。
微量分析与高灵敏度检测:在药物开发、疾病诊断中检测极低浓度目标分子(如细胞因子、病原体核酸)。
4. 操作规范与注意事项
储存条件:-20℃以下避光、干燥保存,避免反复冻融;工作液需现配现用,防止水解或荧光淬灭。
反应条件:
pH控制:严格控制在7.5-8.5范围内,酸性环境会降低反应效率。
温度与时间:37℃避光孵育5-30分钟,根据实验需求调整反应时间以控制信号强度。
溶剂与缓冲液:使用无水有机溶剂(如DMSO)或专用缓冲液,避免强氧化剂(如次氯酸钠)或还原剂(如β-巯基乙醇)。
安全防护:操作时需佩戴手套、护目镜,避免皮肤接触或吸入粉尘;废弃物按危险化学品规范处理。
设备要求:荧光显微镜需配备490nm激发/515nm发射滤片;流式细胞仪需设置相应通道参数。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

关于我们:
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