AF514琥珀酰亚胺酯，AF514 活性酯的反应机制与条件

产品名称：AF514琥珀酰亚胺酯，AF514 活性酯的反应机制与条件

反应机制与条件

反应原理：NHS酯与氨基在pH 7.2-8.5水相体系中反应，生成稳定酰胺键，释放N-羟基琥珀酰亚胺。

优化条件：

缓冲液：常用PBS、HEPES等，避免含氨基缓冲液（如Tris）竞争反应。

温度与时间：室温或37℃反应30分钟至2小时，避免高温导致染料降解。

浓度控制：染料与靶分子摩尔比通常为1:1至10:1，避免过量导致聚集或自猝灭。

注意事项：现配现用，避免NHS酯水解失效；反应后需纯化（如透析、凝胶过滤）去除未反应试剂。

应用场景

生物标记：标记抗体、蛋白质、多肽、核酸等，用于免疫荧光、流式细胞术、Western blot、ELISA等。

成像技术：活细胞/固定细胞荧光显微镜、共聚焦成像、超分辨率成像、多色标记（如与FITC、DAPI、Cy系列染料联用）。

研究领域：蛋白质相互作用、细胞表面受体动态追踪、神经科学（如神经元标记）、癌症研究（如肿瘤细胞标记）、药物开发（如ADC药物偶联）。

技术优势与注意事项

优势：

高特异性：与氨基反应选择性高，减少非特异性结合。

稳定性：标记产物荧光信号持久，抗光漂白能力强。

兼容性：适用于多种缓冲体系及实验条件，不影响生物分子功能。

灵敏度：可检测低至纳摩尔级靶分子，信噪比高。

注意事项：

储存与操作：严格避光、低温保存，避免反复冻融；操作需在通风橱中进行，防止NHS酯吸入。

反应控制：精确控制pH、温度、时间，避免染料降解或副反应。

验证与纯化：标记后通过紫外-可见光谱、质谱或SDS-PAGE验证标记效率，纯化去除未反应试剂。

安全性：遵循实验室安全规范，避免染料接触皮肤或眼睛。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

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