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AF 633 NHS Ester,AF633 活性酯的实验用途

2025-11-20 分享

AF 633 NHS Ester,AF633 活性酯的实验用途

AF633 NHS Ester是一种基于Alexa Fluor 633(AF633)荧光染料的活性酯衍生物。其分子结构由AF633荧光核心与N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)官能团组成。AF633是一种远红光区荧光染料,吸收峰约在633 nm,发射峰约在657 nm,量子产率高、光稳定性好,发射波长远离可见光区,可减少自发荧光干扰。NHS活性酯为亲核反应官能团,可与含氨基的分子形成稳定酰胺键,使AF633可以用于蛋白质、肽或纳米材料等的标记和功能化。

AF633 NHS Ester水溶性较好,可溶于缓冲液或部分有机溶剂中。其化学结构保证荧光性能在偶联后保持稳定,同时NHS活性位点可实现高效偶联,适合用于体外荧光实验及生物标记研究。

2. 化学组成特点

  1. AF633荧光核心
    AF633具有多环共轭结构,包括苯环、吡咯环及氰基衍生共轭体系,使分子能够在远红光区吸收光并发射荧光。其共轭体系提供高量子产率和光稳定性,使其在化学修饰或生物环境中仍能保持荧光性能。

  2. NHS活性基团
    NHS酯为亲核活性官能团,可与蛋白质、肽链或纳米载体表面氨基共价结合,生成稳定酰胺键。反应条件温和,无需催化剂,可在缓冲体系中完成偶联反应。

  3. 水溶性与两亲性特征
    AF633 NHS Ester同时具备亲水性染料骨架和NHS活性端基,分子在水相和有机溶剂中均能良好分散,适合用于生物体系实验。

3. 实验用途

  1. 蛋白质和抗体标记
    AF633 NHS Ester可用于蛋白质、抗体或酶的直接标记,通过NHS酯与氨基共价结合形成稳定标记产物。标记后的分子可用于免疫荧光、Western blot、ELISA等实验,实现远红光荧光检测。

  2. 细胞成像
    标记后的抗体或蛋白可用于细胞成像实验,观察细胞膜、胞内蛋白分布或胞器定位。远红光发射使信号穿透能力更强,并减少与其他可见光荧光染料的干扰,可实现多通道共成像。

  3. 纳米材料功能化
    AF633 NHS Ester可与纳米颗粒表面氨基或载体材料反应,将远红光荧光信号引入纳米材料,实现载体追踪、分布示踪及体外或体内研究。

  4. 分子示踪与能量转移实验
    AF633可作为荧光示踪工具,用于FRET实验(荧光共振能量转移),或与淬灭剂配合研究分子相互作用。通过NHS偶联固定于靶分子,实现高特异性示踪。

  5. 多通道荧光实验
    由于其发射远红光区,与FITC、TRITC、Cy3等可见光荧光染料光谱分离明显,可用于多通道荧光实验,实现复杂样品中多分子追踪和定位。

4. 使用注意事项

  • 储存时需避光、低温条件,以保持NHS活性;

  • NHS酯溶解及偶联应在低水含量缓冲体系中进行,以防水解失活;

  • 偶联完成后应通过色谱或透析去除未反应染料,避免背景干扰。

产品名称:AF633 NHS Ester

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

AF633 NHS Ester

产品目录

凋亡靶向荧光探针ZnDPA-Cy3

凋亡靶向荧光探针ZnDPA-Cy3.5

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仅用于科研,不能用于人体。小编axc