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AF594 Picolyl Azide, Alexa Fluor 594 吡啶基叠氮衍生物的合成及纯化过程

2025-11-26 分享

AF594 Picolyl Azide, Alexa Fluor 594 吡啶基叠氮衍生物的合成及纯化过程

AF594 Picolyl Azide 中文名称为 Alexa Fluor 594 吡啶基叠氮衍生物,或称 AF594 吡啶叠氮染料,是一种红光荧光染料衍生物,具有可用于点击化学反应的叠氮基团,适合标记蛋白质、核酸及小分子等含有炔基的目标分子。Alexa Fluor 594 的吸收峰约在 590 nm,发射峰约在 615 nm,在水溶液和缓冲液中保持良好荧光特性,适用于荧光成像和分子示踪研究。Picolyl Azide 结构在叠氮基团上引入了吡啶环,可增强与铜催化点击化学反应的反应速率和效率,同时保持荧光染料的稳定性。

AF594 Picolyl Azide 的合成可概括为 Alexa Fluor 594 羧酸衍生物与含吡啶的叠氮胺衍生物偶联的步骤。首先,将 Alexa Fluor 594 的羧酸基团通过偶联试剂如 DCC 或 EDC 在无水溶剂(如 DMF 或 DMSO)中活化形成 O‑酰化中间体,然后与含 Picolyl Azide 的胺类化合物反应生成共价偶联产物。整个反应在温和条件下进行,室温搅拌,并避光以防染料降解。反应完成后,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)或硅胶柱层析对产物进行纯化,以去除未反应的原料、偶联副产物以及可能的水解物。纯化过程中可通过监测紫外吸收或荧光信号来确认目标产物的存在和纯度。纯化后的产物可干燥得到固体,储存在低温并避光条件下保存,以维持化学结构和荧光性质的稳定。

在合成过程中,Picolyl Azide 的吡啶环设计有助于增强产物在铜催化叠氮-炔烯环加成反应(CuAAC)中的反应速率,使染料能够在标记含炔基的分子时实现高效率偶联。Covalent coupling 形成的键稳定,标记后的目标分子在水相环境中保持荧光信号,可用于细胞内成像、分子追踪和定量分析。整个结构设计兼顾了染料的光学性质、水溶性以及点击化学反应活性,使 AF594 Picolyl Azide 在标记实验中能够有效结合目标分子,同时保证染料本身的荧光性能和化学稳定性。

合成步骤的核心原理为羧酸活化与胺偶联,通过调节溶剂、温度和反应时间,实现高纯度、稳定的活性产物。纯化后产物的光谱特性应通过 UV-Vis 和荧光光谱测定,以确认吸收峰和发射峰符合预期,并可通过质谱或核磁共振对结构进行验证。该染料通过羧酸与 Picolyl Azide 胺类偶联生成活性偶联产物,可直接用于后续点击化学标记实验,形成稳定的共价标记系统,适合在生物分子示踪和荧光成像研究中应用。

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产品名称:AF594 Picolyl Azide

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

AF594 Picolyl Azide

产品目录

花菁染料CY5.5标记葡聚糖 CY5.5-Dextran

花菁染料CY5.5标记葡萄糖 Cy5.5-Glucose

花菁染料CY5.5标记亲和素 CY5.5-Avidin

花菁染料CY5.5标记巯基 Cy5.5-SH

花菁染料CY5.5标记去氧胆酸 Cy5.5-Deoxycholic Acid

仅用于科研,不能用于人体。小编axc