AF 488 WGA，Alexa Fluor 488 标记小麦胚芽凝集素的合成路线
AF 488 WGA，Alexa Fluor 488 标记小麦胚芽凝集素的合成路线
AF488 WGA 是将小麦胚芽凝集素（Wheat Germ Agglutinin, WGA）与荧光染料 Alexa Fluor 488（AF488）通过化学偶联形成的复合分子。WGA 是一种来源于小麦胚芽的糖结合蛋白，能够特异性识别含有 N-乙酰氨基葡萄糖（GlcNAc）和唾液酸的糖链结构，分子具有较高水溶性和生物相容性。AF488 是一种绿色荧光染料，具有芳香共轭结构和活性官能团（如 N-羟基琥珀酰亚胺酯，NHS），能够与蛋白质氨基形成稳定的共价键。偶联后的 AF488 WGA 分子既保留了 WGA 的糖识别功能，又具备稳定可观测的荧光信号，使其在细胞标记、组织成像和多通道荧光分析中得到广泛应用。
结构上，AF488 WGA 可分为三部分：荧光染料域（AF488）、连接桥域（蛋白质赖氨酸或 N 端氨基）以及生物识别域（WGA 蛋白链段）。荧光染料提供光学信号，蛋白质链段提供可偶联的氨基位点，而 WGA 的糖结合位点保持生物识别能力。整个分子呈现“刚性光学域 + 柔性连接域 + 功能识别域”的结构特征。
合成路线概述
AF488 WGA 的合成主要依赖于蛋白质氨基与染料活性基团之间的共价偶联反应。其基本路线包括以下步骤：
蛋白质活化与缓冲准备
WGA 蛋白在缓冲体系中溶解，通常使用温和的碱性缓冲液，以确保蛋白质中的赖氨酸 ε-氨基和 N 端氨基处于非质子化状态，从而增加亲核性并提高偶联效率。蛋白质在溶液中保持稳定折叠，糖结合位点未受影响，为后续染料偶联提供理想环境。染料活化与偶联
AF488 染料以 NHS 酯活性形式存在，可与蛋白质氨基反应。其反应原理为：蛋白质氨基的孤对电子对 NHS 酯碳原子进行亲核攻击，生成加成中间体，随后离去基团脱离，形成稳定的酰胺键，将荧光染料固定在蛋白质链上。通过调节染料与蛋白质的摩尔比，可控制偶联密度，避免过量染料导致蛋白质聚集或糖结合能力下降。反应控制与优化
偶联反应通常在室温下进行，并通过缓冲体系调节 pH 以优化反应速率和选择性。通过时间控制和溶液稀释，可避免染料自聚和蛋白质交联，保证最终产物的单分散性和水溶性。纯化与分离
偶联完成后，需要去除未反应的游离染料和低分子杂质。常用纯化方法包括透析、凝胶过滤或分子筛层析等，最终获得高纯度、均一性良好的 AF488 WGA。纯化后，荧光染料牢固偶联于蛋白质链上，同时 WGA 蛋白保持糖结合活性，保证分子在生物体系中的功能性。结构与功能确认
偶联产物的特性可通过光学吸收/发射光谱、分子量测定或生物识别实验确认。最终分子在溶液中呈良好分散状态，荧光信号稳定，并保持 WGA 蛋白的糖结合能力，实现光学信号与生物功能的双重整合。
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产品名称：AF 488 WGA
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研
厂家：良林生物
产品目录
花菁染料CY3标记乳清蛋白 CY3-lactalbumin
花菁染料CY3标记乳铁蛋白 CY3-Lactoferrin
花菁染料CY3标记生物素 CY3-Biotin
花菁染料CY3标记双N-羟基琥珀酰亚胺酯 CY3-bis-NHS
花菁染料CY3标记双酸 CY3-diacid
仅用于科研，不能用于人体。小编axc