Cyanine 3 TSA，荧光染料Cy3偶联酪胺的反应条件
Cyanine 3 TSA，荧光染料Cy3偶联酪胺的反应条件
Cyanine 3 TSA 是由荧光染料 Cyanine 3（Cy3）与酪胺（tyramide）通过化学偶联形成的复合分子。Cyanine 3 是一种红色荧光染料，具有共轭双键体系，使其能够吸收绿色光并发射橙红色荧光。酪胺部分是一种酚类化合物，其苯环羟基在过氧化物酶（如辣根过氧化物酶 HRP）催化下可以生成活性自由基，并在邻位形成共价键，将染料牢固标记到靶分子附近。Cyanine 3 TSA 的结构结合了光学信号域（Cy3）与化学反应域（tyramide），使其能够在生物体系中提供高强度荧光信号，同时实现特异性靶向标记。
分子设计中，Cyanine 3 提供红色荧光信号，酪胺端提供在 HRP 催化下生成活性自由基的反应位点。该自由基能够与靶标蛋白或邻近分子上的芳香羟基或酚类官能团形成稳定共价键，从而实现荧光标记的累积与信号增强。分子整体水溶性良好，在缓冲体系中保持均匀分散性和反应活性，适合在细胞或组织样品中使用。
反应条件概述
Cyanine 3 TSA 的标记反应基于酪胺在 HRP 催化下生成自由基的化学特性，其反应条件需兼顾荧光染料稳定性和靶分子活性。反应条件通常具有以下特点：
酶催化条件
反应依赖于过氧化物酶（HRP）催化，通过低浓度过氧化氢（H₂O₂）激活酪胺苯环羟基生成自由基。HRP 催化条件温和，pH 接近生理条件，确保靶蛋白或抗体结构不受破坏，同时保证酪胺自由基的高活性和快速形成。缓冲体系
反应通常在缓冲液中进行，以维持适宜的 pH 值和离子强度。缓冲体系的选择对酶活性和染料稳定性均有影响。温和的缓冲环境可以避免 Cyanine 3 的荧光淬灭，同时保证自由基反应特异性高，减少非特异性结合。染料与酶比例控制
为了实现高效标记和信号增强，需控制 Cyanine 3 TSA 与 HRP 复合物的摩尔比。合理的摩尔比可确保荧光染料在靶标附近均匀分布，同时避免过量染料导致的分子聚集或非特异性标记。反应时间与温度
反应通常在室温下进行，避免高温对蛋白质结构和荧光染料稳定性的影响。反应时间需根据靶标丰度和 HRP 活性进行调控，以保证酪胺自由基充分生成并标记靶分子，同时避免过长时间导致非特异性结合。空间定位与信号增强
酪胺自由基在靶标蛋白或抗体邻近区域共价结合，使荧光信号在局部累积，形成高强度标记。这种局部增强特性对于低丰度蛋白或弱信号标记具有显著优势，可在荧光显微镜下获得清晰的成像效果。兼容性与多通道成像
Cyanine 3 TSA 反应条件温和，不影响其他荧光探针的使用，可与其他颜色荧光染料联合用于多通道成像实验。红色荧光信号与绿色或蓝色通道探针互不干扰，可进行多目标共定位分析。
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产品名称：Cyanine 3 TSA
纯度：95%+
规格：mg/g
用途：科研
厂家：良林生物
产品目录
BHQ-3 NHS荧光淬灭剂 BHQ-3-活性酯
BHQ-3-acid 荧光淬灭剂 BHQ-3-酸
BODlPY FL-COOH，氟化硼二吡咯羧酸
BODlPY FL-N3，氟化硼二吡咯叠氮
仅用于科研，不能用于人体。小编axc