CY3-Enfuvirtide,CY3标记的恩夫韦肽的反应条件
CY3-Enfuvirtide,CY3标记的恩夫韦肽的反应条件
CY3-Enfuvirtide(CY3 标记的恩夫韦肽)是通过将橙红色荧光染料 Cy3 共价连接到恩夫韦肽(Enfuvirtide, T-20)分子上形成的荧光标记肽。恩夫韦肽是一种合成的36肽段抗 HIV 融合抑制剂,能够特异性结合 HIV-1 gp41 蛋白的 HR1 区,阻止病毒与宿主细胞膜融合。通过在恩夫韦肽分子上引入 Cy3 标记,可在保持肽序列特异性结合活性的同时获得光学可追踪功能。Cy3 的吸收和发射波长位于可见光橙红区,信号稳定、亮度高,可通过荧光显微镜、流式分析或多通道成像系统观察 CY3-Enfuvirtide 在溶液体系、细胞表面或病毒膜结合过程中的分布和动态行为。标记位置通常选择在肽 N-端或 C-端的非活性位点,以避免干扰 gp41 结合域,同时保证荧光信号的可靠性。
CY3-Enfuvirtide 的反应条件通常采用温和、特异性的共价修饰策略。Cy3 活性衍生物常用 N-羧基琥珀酰亚胺酯(NHS-ester)或马来酰亚胺衍生物,分别与肽链的赖氨酸氨基或半胱氨酸巯基发生共价键形成稳定产物。反应体系一般选择中性至弱碱性缓冲液(如 PBS、HEPES,pH 7.0–8.5),以维持肽结构稳定并避免非特异性副反应。温度控制在 4–25°C,确保肽序列构象不发生显著改变,同时保证标记效率。
反应过程中,通常使用轻微过量的 Cy3 衍生物以提高标记效率,但同时需避免过量导致非特异性修饰。为减少空间阻碍或影响肽活性,可通过引入柔性连接臂连接 Cy3 荧光团,使其在空间上保持一定自由度,从而不干扰肽与 gp41 的结合位点。反应完成后,可加入低分子量胺类或巯基化合物终止未反应的活性基团,防止进一步副反应或聚合。
标记后的 CY3-Enfuvirtide 通常通过高效液相色谱(HPLC)或透析进行纯化,去除未结合的 Cy3 分子及副产物,获得高纯度的荧光肽。纯化后的产物通过荧光光谱和 UV-Vis 吸收光谱验证标记成功,并通过质谱或核磁共振(NMR)分析确认分子结构完整性和标记位置。功能性验证包括 HIV-1 gp41 结合实验或细胞融合抑制实验,以确认 Cy3 标记未显著影响肽活性。
总之,CY3-Enfuvirtide 是通过共价连接 Cy3 荧光团与恩夫韦肽形成的复合分子,其反应条件强调温和缓冲体系、特异性共价结合和柔性连接设计,以保持肽的结合功能和结构完整性。通过稳定的荧光信号,CY3-Enfuvirtide 可用于体外病毒融合监测、细胞膜结合分析及多通道成像实验,为抗 HIV 药物机制研究、药物递送示踪及分子相互作用分析提供可靠、高效的实验工具。
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产品名称:CY3-Enfuvirtide
纯度:95%+
规格:mg/g
用途:科研
厂家:良林生物

产品目录
CY5水苏糖 CY5-Stachyose
CY5水杨酸 CY5-Salicylic acid
CY5丝素蛋白 CY5-Silk fibroin
Cy5-透明质酸,Cy5-Hylauronic,
Cy5-酰肼,Cyanine5-hydrazide,
仅用于科研,不能用于人体。小编axc