Cy3-labeled MetHb，CY3标记的高铁血红蛋白的化学反应原理

Cy3-labeled MetHb，CY3标记的高铁血红蛋白的化学反应原理

Cy3-labeled 高铁血红蛋白（MetHb, CY3 标记的高铁血红蛋白）是通过将橙红色荧光染料 Cy3 共价连接到高铁血红蛋白分子上形成的荧光标记蛋白。高铁血红蛋白是血红蛋白的一种氧化形式，其中铁离子为三价（Fe³⁺），无法结合氧气。高铁血红蛋白保留血红蛋白的四聚体结构和蛋白骨架，但由于铁离子氧化，具有特定的化学和光学特性。通过在高铁血红蛋白分子上引入 Cy3 荧光团，可获得光学示踪能力，同时保持蛋白的整体结构稳定性和生物化学特性。Cy3 的吸收和发射波长位于可见光橙红区，信号亮度高、稳定，可通过荧光显微镜、光谱分析或多通道成像系统观察 CY3-MetHb 在溶液、细胞或材料体系中的分布和动态行为。标记通常选择在蛋白表面非活性残基，如赖氨酸或半胱氨酸，以避免影响血红蛋白四聚体构象或血红素结合状态。

CY3-MetHb 的化学反应原理主要基于蛋白质表面可反应残基与 Cy3 活性衍生物的共价结合。常用 Cy3 活性衍生物包括 N-羧基琥珀酰亚胺酯（NHS-ester）和马来酰亚胺衍生物，它们能够与蛋白质的氨基或巯基残基发生亲核加成或酰胺化反应，形成稳定的共价键。NHS-ester 衍生物通过与赖氨酸氨基反应生成酰胺键，而马来酰亚胺衍生物则与半胱氨酸巯基形成硫醚键。反应条件温和，通常在 pH 7.0–8.5 的缓冲体系（如 PBS 或 HEPES）中进行，温度控制在 4–25°C，以保持高铁血红蛋白蛋白骨架和血红素基团的完整性。

为了减少荧光团对蛋白质构象的影响，标记设计通常引入柔性连接臂，使 Cy3 在空间上具有一定自由度，避免对四聚体构象或血红素邻近位点产生空间阻碍。反应完成后，通过透析、凝胶过滤或高效液相色谱（HPLC）去除未反应的 Cy3 分子及副产物，保证产物纯度和均一性。标记产物可通过荧光光谱和 UV-Vis 吸收光谱验证标记成功，并通过 SDS-PAGE 和荧光扫描评估分子量和标记均一性，同时通过质谱分析确认标记位点。

Cy3-MetHb 的化学反应原理保证了荧光标记的稳定性和蛋白质功能的完整性，使其可用于体外和细胞实验中蛋白质分布、动力学及相互作用研究。荧光信号可用于监测 MetHb 在溶液或载体体系中的分布、与细胞膜或受体的结合，以及在氧化还原实验中的迁移和转化，为蛋白质研究、药物载体分析及血液化学研究提供直观可视化手段。

总之，Cy3-labeled 高铁血红蛋白是通过 Cy3 活性衍生物与蛋白表面氨基或巯基残基共价结合形成的复合分子，其化学反应原理基于亲核加成或酰胺化反应，结合柔性连接臂设计，实现荧光标记而不破坏蛋白骨架和血红素结构。该标记体系兼具蛋白质功能和光学示踪特性，可用于蛋白分布追踪、相互作用研究及体外化学实验，为血红蛋白及其氧化形式的生物化学研究提供可靠、高效的实验工具。

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产品名称：Cy3-labeled 高铁血红蛋白

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

CY7.5-GE11 CY7.5标记GE11肽

CY7.5-Gluconic acid CY7.5标记葡萄糖酸

CY7.5-Glutamine CY7.5谷氨酰胺

CY7.5-Glycocholic acid CY7.5标记甘氨胆酸

仅用于科研，不能用于人体。小编axc