Cy3-Heparin，CY3标记的肝素的合成步骤

Cy3-Heparin，CY3标记的肝素的合成步骤

Cy3-Heparin（CY3 标记的肝素）是通过将肝素分子与 Cy3 荧光染料共价连接形成的标记体系，用于血液学研究、细胞信号分析及多糖受体研究。肝素是一种高度硫酸化的糖胺聚糖，由重复的二糖单位（D-葡萄糖胺和 L-iduronic/L-葡萄糖醛酸）组成，分子链中含有大量羟基、氨基和硫酸基官能团，呈强负电性，水溶性好，广泛用于研究抗凝血机制、细胞-多糖相互作用以及药物载体功能。Cy3 是一种三甲烯型花菁荧光染料，由两个氮杂芳香环通过共轭多甲烯链形成刚性 π 共轭体系，吸收峰约 550 nm，发射峰约 570 nm，为肝素提供可视化荧光信号，使其在体外实验或细胞体系中实现定量追踪和分子定位。

CY3-Heparin 的合成步骤概述如下：

第一步：肝素活化
肝素分子含有羧基和氨基官能团，可通过化学活化生成易于与 Cy3 结合的反应位点。常用方法包括将肝素羧基通过水溶性偶联试剂（如 EDC/NHS）活化，形成稳定的中间酯，使其能够与含氨基的 Cy3 荧光团发生共价反应。此外，也可通过对肝素羟基进行胺化或氨基化修饰，为荧光标记提供反应位点。

第二步：荧光标记反应
将活化后的肝素与 Cy3 荧光染料（通常为 Cy3-NHS 酯或 Cy3-异氰酸酯）在弱碱性缓冲液（pH 7.5–8.5）中混合，反应一般在室温下进行 1–2 小时。荧光团通过共价键与肝素链上的羧基或氨基结合，形成稳定的标记产物。该过程中，需要控制荧光团与肝素的摩尔比，以保证标记度适中，同时避免过度修饰影响肝素的水溶性和生物活性。

第三步：反应终止与中和
反应完成后，通常加入适量缓冲液或胺类化合物终止剩余活化剂的反应，避免非特异性结合或副反应。此步骤有助于保护肝素的天然构象和功能，并提高标记产物的稳定性。

第四步：纯化
为了去除未反应的 Cy3 染料和副产物，CY3-Heparin 需要进行纯化处理。常用方法包括透析、凝胶过滤色谱（如 Sephadex G-25）或高效液相色谱（HPLC）。纯化后的产物应具有均一的分子量分布和稳定的荧光特性，确保在后续实验中的可靠性。

第五步：性能验证与表征
纯化后的 CY3-Heparin 可通过紫外-可见光谱和荧光光谱确认吸收峰和发射峰，判断标记是否成功；通过糖苷酶或抗凝实验评估肝素功能是否保留；通过质谱（MS）或 NMR 分析标记位点和分子结构完整性，确保荧光标记不影响肝素生物活性。

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产品名称：Cy3-Heparin

纯度：95%+

规格：mg/g

用途：科研

厂家：良林生物

产品目录

CY7标记GE11肿瘤靶向探针 CY7-GE11 tumour

CY7标记L谷氨酸 CY7-L-Glutamic Acid

CY7标记PH响应性穿膜肽 CY7-PH响应性细胞穿膜

CY7标记PLGA微球，100-200nm， CY7-PLGA微球，100-200nm，

CY7标记α1微球蛋白 Cy7-α1-microglobulin

仅用于科研，不能用于人体。小编axc