地高辛NHS酯,Digoxigenin Succinimidyl Ester的实验操作要点
产品名称:地高辛NHS酯,Digoxigenin Succinimidyl Ester的实验操作要点
应用场景
生物分子标记:广泛用于标记DNA/RNA(如原位杂交、FISH)、蛋白质(如免疫印迹、免疫染色),通过抗地高辛抗体实现非放射性检测(荧光/酶促显色)。
分子杂交技术:作为间接标记探针,结合荧光素或酶标记的抗体进行信号放大,提升检测灵敏度(与放射性探针相当)。
蛋白质研究:标记蛋白质以研究其相互作用、亚细胞定位及功能,支持流式细胞术、共聚焦显微镜等多平台应用。
非放射性检测:替代放射性同位素,安全且无半衰期限制,探针可长期保存。
实验操作要点
合成与纯化:地高辛经羧基衍生化后与NHS反应,通过柱层析或HPLC纯化,经NMR、MS确认结构。产品需亲和纯化去除游离染料,纯度≥95%。
偶联反应:目标分子(如蛋白质/氨基修饰核酸)溶于pH 7-9缓冲液(如PBS),NHS酯溶于无水DMSO/DMF配制成1-10 mg/mL储备液。按1:1至1:10摩尔比混合,室温避光反应1-2小时,通过透析/凝胶过滤去除未反应试剂。
储存与稳定性:-20℃避光保存,避免反复冻融;操作时全程避光,防止荧光淬灭或活性损失。
多色实验:需验证光谱兼容性(如与DAPI、Alexa Fluor染料联用),避免信号干扰。
优势与局限性
优势:
高特异性与灵敏度:地高辛作为半抗原,可被高亲和力抗体特异性识别,检测信号强且背景低。
稳定性强:甾体骨架提供结构稳定性,偶联后分子不易降解,支持长时间实验。
应用广泛:兼容多种生物分子及实验平台(如免疫印迹、FISH、流式细胞术)。
局限性:
环境敏感性:对光/温度敏感,需严格避光操作;高温或强光可能导致活性下降。
非特异性结合风险:需优化反应条件(如浓度、时间)以减少非特异性结合,建议设置阴性对照。
仅限科研用途:不可用于人体或药用,需注意产品认证信息。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

关于我们:
良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌,良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者,公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器,良好有完备的生产,研发,检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品,公司目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等。
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