链霉素亲和素,Alexa Fluor 532 偶联物的结构与功能特性
产品名称:链霉素亲和素,Alexa Fluor 532 偶联物的结构与功能特性
基本信息
核心组成:由链霉亲和素(Streptavidin,分子量约60 kDa)与Alexa Fluor 532荧光染料通过共价偶联形成,每个链霉亲和素分子标记2-4个染料分子。
荧光特性:激发波长530-534 nm,发射波长554-558 nm(橙红色荧光),量子产率高、光稳定性强,pH 4-10范围内稳定,水溶性好。
纯度与规格:≥95%,常见规格1mg、5mg、10mg、25mg,形式为冻干粉或溶液。
储存条件:-20℃避光干燥保存,复溶后分装避免反复冻融,溶液可添加0.02%叠氮化钠防腐。
结构与功能特性
链霉亲和素特性
生物素结合能力:源自细菌Streptomyces avidinii,四聚体结构,每个亚基特异性结合一个生物素分子,亲和力较高(Kd≈10⁻¹⁴ M),稳定性强。
低非特异性结合:等电点接近中性,减少与带负电生物分子(如核酸)的非特异性吸附,背景信号低。
Alexa Fluor 532优势
荧光性能:磺化罗丹明衍生物,光漂白率低,亮度高,兼容多色成像(如与AF488、Cy5联用)。
化学稳定性:通过NHS酯与链霉亲和素赖氨酸氨基共价连接,形成稳定酰胺键,保留生物素结合活性。
偶联设计
模块化应用:可结合生物素标记的抗体、核酸探针、脂质体等,实现信号放大(单分子可结合4个生物素)和靶向递送。
灵活性:适用于免疫检测、细胞成像、分子捕获等多种场景,支持定制化标记比例。
应用场景
免疫检测
蛋白质印迹(Western blot):检测生物素标记的蛋白条带,灵敏度极高。
流式细胞术:标记生物素化抗体,进行细胞表面/胞内抗原检测与分选。
ELISA/微孔板检测:作为荧光信号放大工具,替代酶标链霉亲和素。
细胞与分子成像
共聚焦显微镜:标记细胞表面抗原、胞内生物素标记分子,观察细胞形态与功能。
荧光原位杂交(FISH):检测生物素标记的核酸探针,定位基因表达。
活细胞成像:追踪生物素化配体的动态分布(如受体介导的内吞)。
分子标记与分离
蛋白质纯化:固定化链霉亲和素用于纯化生物素标记的蛋白/核酸。
细胞分选:结合生物素化抗体,分离特定细胞群体(如免疫细胞亚群)。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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