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Cy3-labeled,CY3标记视黄醇结合蛋白的表面功能化

2025-12-10 分享

Cy3-labeled,CY3标记视黄醇结合蛋白的表面功能化

Cy3-标记视黄醇结合蛋白(Cy3-Labeled Retinol Binding Protein, Cy3-RBP) 是通过将荧光染料 Cy3 共价连接到视黄醇结合蛋白(Retinol Binding Protein, RBP)分子上形成的荧光复合物,用于蛋白追踪、分子示踪、细胞摄取分析以及生物成像。视黄醇结合蛋白是一类小分子蛋白,分子量约 21 kDa,负责血浆或细胞内视黄醇(维生素 A)运输和稳定,其结构由八股 β 折叠片和螺旋组成,形成疏水口袋以结合视黄醇分子。蛋白表面暴露赖氨酸、半胱氨酸和羟基氨基酸残基,为 Cy3 荧光染料的共价连接提供理想化学位点。Cy3-RBP 结合了蛋白的分子识别功能和 Cy3 的荧光特性,可在体外或体内体系中实现可视化追踪、动力学分析和功能研究。

表面功能化方面,Cy3 的共价标记可在 RBP 表面构建功能化荧光探针。标记常采用 Cy3-NHS 酯或 Cy3-maleimide,通过与赖氨酸 ε-氨基或半胱氨酸巯基发生共价结合,形成稳定的酰胺键或硫醚键。标记位点通常选择在蛋白表面远离疏水结合口袋和活性位点,以保持 RBP 的视黄醇结合能力及分子构象完整性。温和缓冲体系(pH 7–8)和低温避光条件可最大限度避免蛋白变性、聚集或功能丧失,同时保证荧光染料稳定。通过调控 Cy3 与 RBP 的摩尔比和反应时间,可实现标记密度可控,兼顾荧光强度和蛋白功能保持。

表面功能化使 Cy3-RBP 具有高度水溶性和分子分散性。RBP 本身亲水性良好,结合 Cy3 的亲水取代基后,标记产物在缓冲液、培养基及生物体液中分散均匀,避免聚集或沉淀。同时,荧光信号稳定,可在共聚焦显微镜、流式细胞仪或荧光光谱分析中长期检测。表面功能化的荧光探针能够直接与目标细胞膜受体或内吞途径相互作用,实现对蛋白分布、摄取速率及胞内运输过程的可视化分析。

在实验应用中,Cy3-RBP 可用于细胞摄取与运输研究,通过荧光追踪蛋白在细胞内的吸收、内体运输及代谢路径;可用于分子动力学研究,观察 RBP 与视黄醇结合及释放过程;也可用于药物递送体系的示踪,通过荧光标记追踪载体中蛋白的分布和释放行为。表面功能化还可用于构建多功能荧光探针,将 RBP 与其他分子或纳米载体耦合,实现靶向、可视化和定量分析一体化。

Cy3-RBP 的表面功能化还保证了生物相容性和安全性。标记过程中温和条件避免蛋白结构破坏,Cy3 荧光染料的稳定结合保证在细胞和体内实验中不会产生明显的毒性或免疫反应。标记后的 Cy3-RBP 可通过透析、凝胶过滤或超滤去除游离染料,获得高纯度产物,使实验结果可靠且可重复。

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产品名称:Cy3-labeled

纯度:95%+

规格:mg/g

用途:科研

厂家:良林生物

Cy3-labeled

产品目录

EclipseQ Phosphoramidite 荧光淬灭剂

ER-Tracker Green,内质网绿色荧光探针,

ER-Tracker Red,内质网红色荧光探针,

FAM-CRGD 羧基荧光素标记靶向穿膜肽cRGD环肽

FAM-TAT 羧基荧光素标记靶向穿膜肽TAT

仅用于科研,不能用于人体。小编axc