AF 555 Succinimidyl Ester的化学结构与特性

产品名称：AF 555 Succinimidyl Ester的化学结构与特性

1. 化学结构与特性

核心结构：基于花青素Cy3母核，但携带4个磺酸根基团（四磺酸结构），显著增强亲水性，降低标记后蛋白的疏水聚集风险，同时通过电荷排斥减少荧光淬灭，荧光亮度比sulfo-Cy3高20%以上。

荧光特性：激发波长555 nm（黄绿色光），发射波长572 nm（橙红色荧光），消光系数约155,000 cm⁻¹·M⁻¹，光稳定性良好，适合长时间成像。

反应基团：N-羟基琥珀酰亚胺酯（NHS ester），与生物分子中的伯胺（如蛋白质赖氨酸ε-氨基）反应生成稳定酰胺键。

2. 核心用途

生物标记：标记蛋白质、抗体、胺修饰的寡核苷酸、肽段等，用于荧光显微镜、流式细胞术、免疫荧光、Western blot等实验。

成像应用：适用于共聚焦显微镜、活细胞成像、单分子检测，尤其在pH 4-10范围内保持稳定信号，适合酸性或碱性环境实验。

特殊版本：如AF 555-DBCO（含二苯并环辛炔基团），用于无铜点击化学反应，标记叠氮修饰的生物分子，适合活细胞动态追踪。

3. 反应条件与操作

溶剂与缓冲液：通常溶解于无水DMF或DMSO，反应在0.1–0.2 M碳酸氢钠缓冲液（pH 8.3）中，室温反应30-60分钟。

优化建议：通过调整染料与蛋白的摩尔比（如5:1至20:1）优化标记效率；中性pH可选择性标记氨基末端，减少非特异性反应。

纯化：标记后需通过透析、凝胶过滤或脱盐柱去除游离染料。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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