Fluorescein-PEG-Amine,荧光素-聚乙二醇-胺的合成与纯化方法
产品名称:Fluorescein-PEG-Amine,荧光素-聚乙二醇-胺的合成与纯化方法
1. 化学结构与组成
结构特征:一端为荧光素(FITC)基团,另一端为伯氨基(-NH₂),中间通过亲水性PEG链连接。PEG链长度可定制(如PEG3、PEG1000、2000、5000、10k、20k等),分子式随链长变化(如Fluorescein-PEG3-Amine为C₂₉H₃₁N₃O₈S,分子量581.64 g/mol),CAS号包括1807539-04-3(PEG3版本)。
官能团特性:
荧光素:激发波长490-495 nm,发射波长515-520 nm,呈现绿色荧光,易通过颜色和荧光追踪。
氨基:高反应活性,可与羧酸、醛基、活化酯(如NHS)、环氧基等发生酰胺化、席夫碱或开环反应,形成稳定共价键。
PEG链:提供水溶性、生物相容性,延长体内循环时间,减少非特异性吸附。
2. 物理化学性质
外观:橙色/黄色固体或粘稠液体,分子量越高粘度越大。
溶解性:易溶于水、DMSO、DMF、氯仿等极性溶剂,部分溶于脂溶性溶剂。
稳定性:对光敏感,需避光保存;建议在-20℃至-5℃储存,充惰性气体(如氮气)防止氧化降解;高温或强酸环境可能导致荧光素淬灭或PEG链断裂。
荧光特性:荧光强度高,光稳定性好,适用于长时间成像;荧光信号可通过光谱仪或荧光显微镜检测。
3. 合成与纯化方法
合成策略:
EDC/NHS偶联:荧光素的羧基经EDC/NHS活化后,与PEG-胺的氨基反应生成酰胺键,转化率可达90%以上。
点击化学:利用叠氮-炔环加成反应构建三唑环连接荧光素和PEG-胺,实现高效偶联。
开环聚合:以PEG为引发剂,与单体(如己内酯)在催化剂下开环聚合,形成嵌段共聚物。
纯化技术:
色谱法:硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇/氨水洗脱)、C18反相柱层析分离目标产物与杂质。
透析/沉淀:通过透析去除小分子杂质,或用乙醚、己烷非溶剂沉淀纯化。
表征:通过NMR、FTIR、质谱(MS)确认结构与纯度(≥95%),GPC测定分子量分布。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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