小麦胚凝集素偶联辣根过氧化物酶,WGA-HRP的合成方法
产品名称:小麦胚凝集素偶联辣根过氧化物酶,WGA-HRP的合成方法
1. 结构与特性
组成:由小麦胚芽凝集素(WGA,分子量43.2 kDa)与辣根过氧化物酶(HRP,分子量约40 kDa)通过共价偶联(如戊二醛交联、碳二亚胺法或高碘酸钠氧化法)形成。WGA特异性识别N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)和唾液酸残基,HRP催化过氧化氢氧化底物(如TMB、DAB)产生颜色/荧光信号。
核心功能:结合WGA的糖靶向性(如细胞膜糖蛋白、神经元表面)与HRP的酶催化信号放大能力,实现高灵敏度、高特异性检测。
物理性质:固体/粉末或溶液,纯度≥95%,需避光、-20℃以下干燥保存,避免反复冻融。
2. 合成方法
化学偶联:
活化步骤:HRP经高碘酸钠氧化生成醛基,或WGA/HRP通过戊二醛/碳二亚胺(EDC)活化氨基。
偶联条件:pH 7-9的碳酸盐/PBS缓冲液,避光室温反应2-4小时,摩尔比HRP:WGA通常为5-10:1。
纯化:透析、Sephadex G-25凝胶过滤或超滤离心去除游离成分,HPLC验证纯度。
关键参数:反应需控制温度、pH及催化剂,避免副反应(如WGA活性损失或HRP失活)。
3. 应用场景
生物成像与细胞标记:
神经科学:神经元顺行/逆行示踪,绘制神经通路(如脑区连接、突触结构)。
细胞生物学:细胞膜/核膜标记、糖蛋白分布分析、细胞间相互作用研究。
组织化学:免疫组化(IHC)中组织切片的糖结构定位(DAB显色),病理诊断辅助。
免疫检测:
ELISA/Western Blot:检测糖基化修饰、黏附因子或病原体表面糖类,实现定量/定性分析。
流式细胞术:细胞表面糖链标记,区分细胞亚群。
糖生物学研究:蛋白质糖基化分析、癌症相关糖链表达模式研究、生物药开发中的糖基化质量控制。
微生物学:革兰氏阳性菌、酵母细胞表面糖结构标记,研究微生物-宿主相互作用。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

关于我们:
良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌,良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者,公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器,良好有完备的生产,研发,检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品,公司目前经营的产品主要有合成磷脂,PEG衍生物,嵌段共聚物,纳米金,磁性纳米颗粒,介孔二氧化硅,活性荧光染料,荧光量子点,点击化学和大环配体等等。
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