CF680R-Streptavidin,CF680R标记链霉亲和素的荧光性能
产品名称:CF680R-Streptavidin,CF680R标记链霉亲和素的荧光性能
1. 关键特性
荧光性能:
近红外优势:发射波长位于近红外区(701nm),可穿透深层组织,减少生物样本自发荧光干扰,提升信噪比。
光稳定性:高亮度、抗光漂白,适合长时间成像及活体实验。
多色兼容性:可与CF488、CF594、Cy5等染料联用,实现4-100种靶点的多色荧光检测。
生物活性:
保留链霉亲和素对生物素的高亲和力,可结合生物素化抗体、核酸、肽链或纳米材料。
通过TSA(酪胺信号放大)技术,在HRP催化下实现信号几何级数放大(灵敏度提升百倍以上),尤其适用于低丰度靶标(如微量蛋白、稀有细胞亚群)。
稳定性:水溶性好,在PBS或碳酸盐缓冲液(pH 7.2-8.5)中稳定,避免含氨基/巯基的缓冲液干扰。
2. 核心应用场景
免疫检测:
流式细胞术:作为近红外通道标志物,检测生物素化抗体,支持高参数细胞分型及功能分析。
免疫荧光/免疫组化:用于组织/细胞中生物素化抗原的定位(如肿瘤标志物、受体表达),适配共聚焦/超分辨显微镜(如STED)。
免疫印迹(Western Blot):检测膜上的生物素标记蛋白,具有宽线性范围和高灵敏度。
活体成像:
动物模型:肿瘤示踪、炎症监测、药物/纳米材料体内分布分析,利用近红外穿透深度大的特点。
分子示踪:标记生物素化纳米颗粒、脂质体或金纳米颗粒,追踪纳米药物递送体系。
细胞与分子研究:
亚细胞结构成像:定位线粒体、内质网等结构,追踪细胞迁移、内吞等动态过程。
核酸检测:结合FISH技术,增强低丰度mRNA/DNA信号,用于基因表达定位与突变分析。
多重荧光检测:通过循环标记技术(如抗体剥离法),实现4-9轮多色成像,适配高内涵成像系统。
3. 制备方法
化学偶联:采用NHS酯法或马来酰亚胺法,将CF680R与链霉亲和素的赖氨酸残基共价结合,经纯化去除未结合成分,确保产物纯度(≥95%)和活性。
优化:部分产品采用水溶性修饰(如sulfo-CF680R),提升溶解度与生物相容性。
4. 使用注意事项
存储与操作:
存储条件:-20℃干燥避光保存(固体/粉末),或2-8℃短期保存(液体),避免反复冻融和强光照射;溶解后需现配现用。
稀释与反应:按1:500-1:1000稀释使用,实验前离心(5000×g,3分钟)去除蛋白聚集体;严格控制HRP浓度、H₂O₂用量及反应时间(5-10分钟),平衡信号强度与背景噪声。
实验优化:
缓冲液选择:使用PBS或碳酸盐缓冲液(pH 7.2-8.5),避免含氨基/巯基的缓冲液干扰标记物稳定性。
对照实验:设置未标记对照组,排除非特异性信号;优化洗涤步骤(如高盐缓冲液)减少非特异性吸附。
多色兼容性:确认仪器滤光片覆盖所有荧光通道,避免光谱重叠。
安全性:仅供科研使用,避免皮肤/眼睛接触;废弃物按化学/生物废弃物处理。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

关于我们:
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