APC-Streptavidin,链霉亲和素-APC的基础信息与结构特性
产品名称:APC-Streptavidin,链霉亲和素-APC的基础信息与结构特性
1. 基础信息与结构特性
组成:由别藻蓝蛋白(APC,Allophycocyanin)与链霉亲和素(Streptavidin)通过共价偶联形成。APC为藻胆蛋白家族成员,分子量约120 kDa;链霉亲和素为四聚体蛋白,分子量约52 kDa,每亚基可结合1个生物素分子(总结合位点4个)。
荧光特性:APC激发波长650–651 nm,发射波长660 nm(远红光区),荧光量子产率高,光稳定性良好,穿透力强,信噪比高,适配多色标记(如与FITC、PE无显著光谱重叠)。
生物素结合能力:链霉亲和素与生物素结合解离常数极低(Kd≈10⁻¹⁵ M),亲和力远高于传统亲和素(Avidin),且非特异性结合少,适合复杂样本检测。
2. 核心应用场景
流式细胞术:作为第二抗体,结合生物素化抗体标记细胞表面抗原(如CD分子),实现高灵敏度红色荧光检测,支持多色流式分析。
免疫检测:用于ELISA、Western blot、免疫组化(IHC)中生物素化探针的检测,增强信号强度,提升低丰度靶标(如肿瘤标志物、细胞因子)的检测灵敏度。
荧光显微成像:结合生物素化核酸探针(如FISH)或抗体,用于细胞/组织内分子定位与分布分析。
多重标记实验:远红荧光特性减少光谱干扰,适配其他荧光染料(如FITC、PE)实现多参数同步检测。
3. 储存与使用条件
储存条件:2–8℃运输,-20℃长期保存(至少1年),避免反复冻融和强光照射。冻干粉末复溶后需尽快使用。
操作注意事项:
佩戴防护装备(手套、护目镜),避免直接接触皮肤或吸入粉末。
使用前验证批次纯度(≥95% HPLC)及荧光稳定性。
优化反应条件(pH、温度、离子强度)以减少非特异性结合,如血清样本中生物素化抗体捕获效率可达95%以上。
兼容性:适配多种缓冲液(如PBS、TBS),避免强酸/碱及氧化环境。
4. 优势与对比
灵敏度优势:相比传统荧光标记,信号放大10–100倍,适合低丰度靶标检测。
稳定性优势:APC光稳定性优于部分有机染料(如FITC),链霉亲和素耐变性条件(如高温、有机溶剂)。
替代方案:对于更高灵敏度需求,可考虑iFluor 647-Streptavidin或量子点标记技术;多色标记可搭配PE-Cy7、PerCP等。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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