Alexa Fluor488-azide，Alexa Fluor 488 叠氮的关键应用

产品名称：Alexa Fluor488-azide，Alexa Fluor 488 叠氮的关键应用

1. 结构与核心特性

分子结构：基于Alexa Fluor 488染料（绿色荧光核心，π电子体系增强荧光亮度），末端引入叠氮基团（-N₃）。分子式为C₂₇H₂₆N₆O₁₀S₂，分子量约643-861 Da（具体取决于修饰基团）。

荧光特性：激发波长495-499 nm，发射波长519-520 nm，光稳定性良好，适合共聚焦显微镜、流式细胞术及高内涵筛选（HCS）。

反应活性：叠氮基团通过铜催化点击化学（CuAAC）与炔烃（如生物分子修饰的炔基）高效共价结合，形成稳定三唑环，实现生物正交标记。

2. 合成方法

制备路径：在Alexa Fluor 488的氨基或羧基上引入叠氮基团，常见步骤包括：

溶解：用DMSO或DMF配制10 mM溶液，避光操作。

点击反应：与炔烃在CuSO₄（1 mM）、配体（如TBTA）及还原剂（如抗坏血酸钠）存在下，25℃孵育30分钟至2小时，形成Cu(I)-配体复合物催化反应。

纯化：反应后加入EDTA（10 mM）螯合铜离子，通过透析、凝胶过滤或亲和层析去除未反应染料。

质量控制：通过SDS-PAGE荧光成像、UV-Vis光谱或质谱验证标记效率，纯度≥95%。

3. 关键应用

生物标记：

蛋白质/核酸标记：标记抗体、肽段、核酸探针或糖类，用于免疫荧光（IF）、原位杂交（ISH）及细胞成像，追踪生物分子动态。

活细胞成像：标记细胞表面受体或内部分子，观察细胞结构、信号传导或药物递送过程。

生物正交化学：与炔烃修饰的生物分子（如代谢标记的糖、脂质）结合，实现无干扰的体内外标记，适用于信号放大（如酪胺信号放大技术）或多色荧光实验。

诊断与检测：在免疫组化（IHC）、流式细胞术及多重荧光分析中作为高灵敏度探针，检测低丰度靶标。

4. 储存与操作注意事项

储存条件：-20℃避光冷冻保存，避免反复冻融以防荧光淬灭或叠氮分解。现配现用，溶解后建议分装保存。

安全规范：

叠氮基团在高温或酸性条件下可能释放有毒氮气，需在通风橱中操作，避免与金属或还原剂接触。

仅供科研使用，不可用于人体实验或临床诊断。

反应优化：铜催化剂需严格控制浓度以减少细胞毒性，无铜点击化学（如环辛炔反应）可替代用于活细胞应用。

供应商：西安昊然生物

关于我们：

西安昊然生物经营的产品种类包括有：近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二影产品，荧光蛋白及荧光探针等，欢迎咨询。

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