1644558-28-0;Sulfo-NHS-Diazirine的结构与功能特性
产品名称:1644558-28-0;Sulfo-NHS-Diazirine的结构与功能特性
结构与功能特性
双功能基团设计
NHS酯端:与含氨基生物分子(如蛋白质、抗体、多肽)的伯胺基团(-NH₂)特异性反应,形成稳定酰胺键,适用于标记、纯化及偶联。
Diazirine光活化基团:在紫外光(365 nm)照射下生成高活性卡宾中间体,可与邻近分子(如蛋白质、核酸、脂质)的C-H、N-H、O-H键发生非特异性交联,实现空间分辨的分子互作捕获。
水溶性增强:磺酸盐(Sulfo)基团提升水溶性,避免有机溶剂依赖,适用于细胞、膜蛋白等复杂生物体系的原位交联。
可调控性:通过调整spacer长度(如3.9Å短链或12.5Å长链)、是否含二硫键(如SDAD/Sulfo-SDAD),实现交联可逆性(还原剂如DTT可裂解二硫键)或膜通透性控制。
应用领域
蛋白质互作研究:捕获蛋白质-蛋白质相互作用(PPIs)、膜蛋白复合物结构解析、交联质谱(XL-MS)分析。
生物标记与成像:荧光标记(如FAM-NHS)、抗体/核酸偶联、活细胞示踪及体内成像。
药物开发:靶点验证、PROTAC技术中的Linker设计、纳米载体表面功能化。
材料科学:微流控芯片、生物传感器表面修饰,增强生物分子固定化效率。
合成与操作要点
合成路线:NHS酯与Diazirine通过戊酸酯链连接,磺酸盐修饰提升水溶性。
实验条件:
溶解性:NHS-酯型溶于DMSO/DMF,Sulfo型溶于水/PBS;避免高浓度盐溶液沉淀。
反应条件:pH 7-9弱碱性环境,室温孵育10-30分钟或低温延长至2小时;紫外激活需365 nm长波UV灯(避免短波损伤生物分子)。
终止与纯化:Tris淬灭过量试剂,Zeba柱或透析去除小分子杂质。
安全注意:光敏感,需避光操作;有机溶剂使用需在通风橱中进行;部分试剂含可裂解基团,需控制还原剂浓度。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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