α-Bungarotoxin-AF430的结构特性与功能协同

产品名称：α-Bungarotoxin-AF430的结构特性与功能协同

1. 结构特性与功能协同

α-Bungarotoxin（α-BTX）核心结构：

来源于东亚眼镜蛇毒液，为74个氨基酸组成的多肽（分子量约8 kDa），具有“三指结构”，对烟碱型乙酰胆碱受体（nAChR）的α1亚基（尤其是α7亚型）具有高亲和力（IC₅₀≈1.6 nM），可不可逆阻断神经肌肉接头处的乙酰胆碱信号传递。

含多个赖氨酸残基（自由氨基），通过NHS酯化反应与荧光染料偶联，保持生物活性不受显著影响。

AF430荧光特性：

蓝色荧光染料，激发波长430 nm，发射波长470-540 nm（绿色荧光），量子产率约0.65，光稳定性适中，pH耐受范围4-10，水溶性良好，适合多色成像（如与AF488、Cy5组合，减少光谱串扰）。

偶联设计：

通过氨基-羧基缩合反应（如NHS酯活化）形成稳定酰胺键，连接键在生理环境下不易水解，确保探针在实验中的靶向稳定性。偶联后分子量约9-10 kDa，保留毒素的受体结合能力与染料的荧光特性。

2. 反应特性与条件优化

偶联反应：

条件：pH 7.2-8.5（磷酸盐/碳酸盐缓冲液），室温或4°C反应30分钟至2小时，染料与蛋白摩尔比3-10:1（避免过度标记影响活性）。

纯化：反应后通过透析、凝胶过滤或超滤去除未反应染料，缓冲液置换至PBS（pH 7.4）用于实验。

储存与稳定性：

需-20℃以下干燥避光保存，避免反复冻融；有机溶剂（如DMSO）体积分数≤10%，防止蛋白变性。长期储存可添加甘油或抗氧剂（如BHT），光敏性染料需全程避光操作。

3. 应用场景与创新方向

神经科学与成像：

受体定位与动态追踪：标记神经肌肉接头（NMJ）的nAChR，通过共聚焦/STED显微镜观察受体分布、内吞/外排过程及突触可塑性；活细胞成像中监测受体运输与动态变化。

多色共定位：与GFP、AF488、Cy5等组合，实现nAChR与细胞骨架、信号分子的空间互作研究（如405 nm激光激发AF430，与GFP信号区分）。

药物开发与筛选：

受体结合实验：通过流式细胞术或荧光偏振法筛选nAChR靶向药物（如α7激动剂/拮抗剂），测定受体占有率与药物亲和力。

机制研究：分析毒素对GABA_A受体（含β3亚基）的阻断作用，探究神经信号传导的调控网络。

材料与生物工程：

修饰纳米颗粒/脂质体表面，构建靶向递送系统；结合生物素-链霉亲和素系统，用于免疫沉淀或Western blot检测nAChR表达水平。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

良林科研服务平台是西安瑞胜生物科技有限公司旗下的品牌，良林科研服务平台致力于服务全球研发工作者，公司配备了化合物合成、纯化、冻干、质量检测与分析等精密仪器，良好有完备的生产，研发，检测全生产线的能力。良林生物致力于为客户提供有机化合物定制合成及生产服务。 我公司生产销售科研级别的药物传递和药物纳米靶向方面的产品，公司目前经营的产品主要有合成磷脂，PEG衍生物，嵌段共聚物，纳米金，磁性纳米颗粒，介孔二氧化硅，活性荧光染料，荧光量子点，点击化学和大环配体等等。

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