5-TAMRA cadaverine，5-四甲基罗丹明尸胺的实验优化

产品名称：5-TAMRA cadaverine，5-四甲基罗丹明尸胺的实验优化

1. 核心特性与基础应用

结构特性：5-TAMRA cadaverine由四甲基罗丹明（TAMRA）与尸胺（双氨基脂肪族化合物）共价结合，分子量约514.6 g/mol，兼具荧光标记能力与高反应活性氨基基团。尸胺的氨基可与羧基、活性酯等形成稳定酰胺键，实现蛋白质、核酸等生物分子的荧光标记。

荧光性能：激发波长495 nm，发射波长520 nm（绿色荧光），量子产率高（约0.92），光稳定性良好，抗光漂白，适合长时间成像（如共聚焦显微镜、流式细胞术）。

应用场景：生物分子标记（如蛋白定位、核酸探针）、细胞成像、酶活性检测、多重标记实验、食品新鲜度检测（尸胺作为腐败标志物）等。

2. 实验优化方向与策略

（1）合成与标记反应优化

反应条件：

活化剂选择：使用EDC/NHS或DCC活化羧基，促进尸胺与TAMRA的共价结合。反应pH控制在7.0-8.0，温度室温至37℃，时间30-60分钟。

摩尔比优化：蛋白/试剂比例1:1至10:1，确保充分标记且减少非特异性结合。

纯化步骤：透析、凝胶过滤或超滤法去除游离染料，通过紫外/荧光光谱确认标记效率。

双氨基利用：尸胺的双氨基特性可实现与多羧基分子的偶联，或构建多标记复合物，增强信号强度与特异性。

（2）荧光性能提升

光稳定性增强：避免长时间光照，使用抗氧化剂（如BSA）减少光漂白。

多色标记兼容：与FITC、Cy3等染料组合时，需匹配激发/发射波长（如488 nm激光+绿色通道），避免光谱重叠。

亮度优化：通过调整染料浓度或结合信号放大技术（如TSA）提高信号强度。

（3）生物相容性与细胞毒性

细胞活性评估：标记后验证生物分子功能（如酶活性、细胞增殖），确保无显著影响。

活细胞实验：优化孵育条件（浓度1-10 μM，时间30分钟），避免高浓度导致的细胞毒性。水溶性版本需通过显微注射或电穿孔导入胞内。

（4）储存与操作规范

储存条件：-20℃避光干燥保存，分装避免反复冻融；工作液现配现用，24小时内使用。

缓冲液选择：PBS或Tris缓冲液（pH 6-8），避免含氨基缓冲液（如甘氨酸）竞争抑制标记反应。

操作避光：全程避光防止荧光淬灭，使用低蛋白结合耗材减少吸附损失。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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