FITC标记的羊抗人IgM，FITC-Human IgM

产品名称：FITC标记的羊抗人IgM，FITC-Human IgM

1. 应用场景与实验设计

免疫荧光（IF）：用于细胞或组织切片中人IgM的定位检测，如B细胞表面IgM、浆细胞分泌型IgM的共定位分析。常与抗羊IgG二抗（如FITC-羊抗人IgM+Cy3-羊抗人IgG）联用实现多色成像。

流式细胞术（FCM）：检测细胞表面IgM表达水平，如B细胞发育阶段分析（如CD19⁺IgM⁺前B细胞）、自身免疫病中B细胞活化状态评估。

ELISA/免疫印迹（WB）：作为检测抗体用于人IgM的定量或定性分析，如血清IgM水平检测、病原体特异性IgM抗体筛查（如肝炎、自身免疫病）。

细胞分选与功能研究：通过磁珠分选IgM⁺细胞，或追踪IgM介导的信号通路（如BCR信号传导、补体激活）。

2. 制备工艺与质量控制

标记流程：

活化与偶联：抗体经透析去除氨类物质后，与FITC在pH 9.0-9.5的碳酸盐缓冲液中室温避光反应2-4小时，通过控制FITC/抗体比例（通常10:1至50:1摩尔比）调节标记度。

纯化与质检：通过凝胶过滤（如Sephadex G-25）或透析去除游离FITC，经SDS-PAGE验证抗体完整性，ELISA或流式细胞术验证标记后抗体的特异性及亲和力，荧光分光光度计测定标记效率（FITC/抗体比）。

质量标准：纯度≥95%（SDS-PAGE），特异性（与无关抗原交叉反应率＜5%），荧光强度（与未标记抗体相比信号增强10³-10⁴倍），无菌、无内毒素（≤1 EU/mL）。

3. 储存与操作规范

储存条件：-20℃避光、干燥保存，分装小体积（如5-10 μL/管）避免反复冻融；配液后4℃可稳定1-2周，避免长期存放。

操作要求：全程避光（如铝箔包裹容器），避免与强还原剂（如DTT）、高浓度金属离子或酸性溶液接触以防荧光淬灭；稀释时使用无胺缓冲液（如PBS），避免Tris或甘氨酸。

安全注意：FITC具有潜在致敏性，操作时需戴手套、护目镜，避免吸入或皮肤接触；废弃物按生物危害处理。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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