Thiol-PEG-Cholesterol，CLS-PEG-SH，胆固醇-聚乙二醇-巯基的关键影响因素

产品名称：Thiol-PEG-Cholesterol，CLS-PEG-SH，胆固醇-聚乙二醇-巯基的关键影响因素

1. 反应动力学与条件敏感性

pH依赖性：

巯基反应窗口：最佳pH 6.5-7.5，此时巯基去质子化（-S⁻）增强亲核性，与马来酰亚胺反应速率达10³-10⁴ M⁻¹s⁻¹；pH＜6时反应速率骤降，pH＞8时巯基易氧化（生成-S-S-）。

水解与氧化风险：巯基在氧气或金属离子存在下易氧化为二硫键，需惰性气氛（如氮气）保护；水溶液中需添加抗氧化剂（如DTT、TCEP）。

温度效应：

反应速率：温度每升高10℃，反应速率提升2-3倍，但高温（＞40℃）可能加速巯基氧化或PEG链降解。

储存稳定性：-20℃避光储存可抑制氧化，室温下需现配现用；分装避免反复冻融。

浓度与比例：

底物浓度：巯基与马来酰亚胺的摩尔比通常为1:1至5:1（过量巯基提高偶联效率），但过高浓度可能导致非特异性结合或沉淀。

蛋白质标记：需控制巯基/蛋白摩尔比（如1:1至10:1），避免过度修饰影响生物活性。

2. 溶剂与介质影响

溶解性调控：

有机溶剂：短链PEG溶于水，长链需DMSO、DMF或氯仿助溶；反应时需稀释至水相缓冲液（含少量有机溶剂促进溶解）。

离子强度：高盐浓度可能屏蔽电荷，影响反应速率或导致沉淀，需优化缓冲液离子强度（如PBS、HEPES）。

表面活性剂：添加Tween-20等可减少非特异性吸附，提升标记特异性。

3. 生物相容性与毒性评估

PEG链优势：长链PEG（＞2k Da）显著降低免疫原性，减少蛋白吸附，适用于体内药物递送或医用植入材料。

毒性风险：

巯基代谢：巯基氧化产物（如磺酸）需评估长期毒性；未反应巯基可能引起细胞毒性，需确保完全偶联。

胆固醇代谢：胆固醇在体内代谢为胆酸，需评估长期蓄积风险；合成衍生物需验证代谢途径安全性。

免疫原性：PEG链可能引发抗PEG抗体，需通过动物实验评估免疫反应。

温馨提示：仅用于科研，不能用于人体实验！wyh

关于我们：

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