M-PEG-SCM,甲氧基PEG琥珀酰亚胺乙酸酯的连接方式
产品名称:M-PEG-SCM,甲氧基PEG琥珀酰亚胺乙酸酯的连接方式
核心连接反应:NHS 酯基与氨基的酰胺化缩合
M-PEG-SCM 的连接为氨基特异性的不可逆共价反应,仅与含伯氨基(-NH₂,如赖氨酸 ε-NH₂、氨基末端 α-NH₂) 的分子发生反应,不与羧基、巯基、羟基等基团结合,反应条件温和(生理 pH / 室温),无需强引发剂,是生物体系中最常用的 PEG 化连接方式,核心反应式为:
CH3O−PEG−CH2COO−NHS+R−NH2→CH3O−PEG−CH2CONH−R+NHS
反应核心机制
含氨基分子(R-NH₂)的伯氨基为亲核位点,对 M-PEG-SCM 的 NHS 酯基的羰基碳(C=O)发生亲核进攻;
羰基碳发生电子重排,高活性的 NHS 酯基作为离去基团脱离,生成 N - 羟基琥珀酰亚胺(NHS)小分子;
最终 PEG 分子的乙酸基与氨基分子形成稳定的酰胺键(-CONH-),实现 M-PEG-SCM 与目标分子的共价连接,酰胺键为生物体系中最稳定的共价键之一,无自发解离特性。
最优反应条件
该反应对 pH 敏感,需严格控制体系酸碱度,避免 NHS 酯基水解或氨基质子化,常规最优条件为:
pH 范围:7.0~8.5(优选 7.4~8.0,如 PBS、HEPES 缓冲液),此条件下氨基呈非质子化的亲核状态(-NH₂),NHS 酯基水解速率最低;
温度:室温(20~25℃)或 4℃,高温(>37℃)会加速 NHS 酯基非特异性水解,降低连接效率;
溶剂:水性缓冲体系(为主),可少量添加 DMF/DMSO(≤10%)提升疏水分子溶解度,无有机溶剂时也可高效反应;
摩尔比:M-PEG-SCM: 目标分子 = 5~20:1(根据目标分子氨基数量调整),过量的 M-PEG-SCM 可提升氨基修饰率。
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!wyh

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