2692677-79-3,Cy3 DBCO,花青素CY3二苯基环辛炔
Cy3 DBCO(中文名称:花青素CY3二苯基环辛炔),CAS号2692677-79-3,英文别名包括DBCO-Cy3、Cyanine3-DBCO,是一种整合了Cy3荧光团与DBCO点击化学基团的功能性荧光标记试剂,核心优势在于兼具优异的荧光性能与特异性化学反应能力,广泛应用于生物标记、荧光成像及分子生物学基础研究领域。其分子结构由Cy3荧光团与DBCO基团通过稳定的共价键连接构成,Cy3作为经典的橙色荧光团,赋予试剂明亮的荧光信号,而DBCO基团则使其具备无铜点击化学反应活性,无需金属催化剂即可与叠氮基团发生高效特异性环加成反应,且反应条件温和,不会破坏生物分子的天然结构与活性。
物理化学性质方面,Cy3 DBCO通常呈现为红色至紫色粉末状,具有一定的吸湿性,因此需在干燥、避光、低温(-20℃)条件下储存,避免荧光淬灭与试剂降解。该试剂在有机溶剂(如DMSO、甲醇、DMF)中溶解性良好,可快速溶解形成稳定溶液;在水相中需借助PBS等缓冲液,通过超声或搅拌辅助溶解,且在生理pH范围内(7.0-7.5)荧光强度保持稳定,当pH值过高或过低时,可能出现荧光强度下降的情况,实验中需注意维持反应体系pH稳定。光学特性上,其激发波长约为550-555nm,发射波长约为570-575nm,属于橙红色荧光波段,荧光量子产率约为0.31,光稳定性优良,可满足长时间荧光成像的需求,且荧光信号明亮,检测灵敏度高。
合成过程主要围绕Cy3荧光团与DBCO基团的偶联反应展开,首先制备带有活性基团(如氨基、羧基)的Cy3衍生物与DBCO衍生物,再根据两者的活性基团选择合适的偶联方法,常用缩合剂(如EDC·HCl和NHS)催化酰胺化反应,将两者稳定连接形成目标产物。合成过程中需精确控制反应温度、时间与反应物比例,以提高产物产率与纯度,后续通过柱层析、HPLC等纯化手段,可获得纯度≥95%的Cy3 DBCO,满足实验研究的高要求。
应用领域聚焦于生物分子标记与细胞成像研究,在生物分子标记中,可用于标记带有叠氮基团的核酸、蛋白质、多肽、糖类等,例如对DNA进行叠氮修饰后,加入Cy3 DBCO通过点击反应实现荧光标记,标记后的DNA可用于荧光原位杂交(FISH)、DNA测序等实验,借助橙红色荧光实现目标分子的精准定位与检测。在细胞成像中,可通过细胞摄取或代谢标记将叠氮基团引入细胞内特定分子,再与Cy3 DBCO反应实现活细胞内目标分子的荧光标记,因反应温和、细胞毒性低,可较好维持细胞正常生理状态,用于观察目标分子的分布与动态变化。此外,还可应用于免疫分析、药物筛选等领域,为基础生物研究提供可靠的工具支持。
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