5-FAM-NH₂・HCl,5 - 羧基荧光素-氨基盐酸盐,CAS:138589-19-2
5-FAM NH₂5-FAM-NH₂・HCl(5 - 羧基荧光素 - 氨基盐酸盐)是 5 - 羧基荧光素(5-FAM)经氨基化修饰并成盐的经典绿色荧光标记试剂,以优异的水溶性与反应活性,成为生物分子标记领域的核心工具。其分子式为 C₂₇H₂₇ClN₂O₆,分子量 510.97,外观为橙黄色固体,可溶于水、DMSO、DMF 等多种溶剂,盐酸盐形式使其在水性体系中溶解度较游离氨基提升 4-6 倍,同时避免氨基自聚,显著增强反应稳定性。
该化合物核心优势在于氨基 - 荧光双功能:5-FAM 母核提供稳定绿色荧光,激发波长 494nm、发射波长 518nm,荧光量子产率约 0.77,光稳定性强,适配常规荧光检测设备;末端脂族氨基(-NH₂・HCl)为反应活性位点,在 pH7.0-8.0 条件下,可经 EDC/NHS 催化与羧基、直接与活性酯发生酰胺化反应,形成稳定共价键,标记特异性高,且对生物分子空间结构影响*小。
在应用场景中,5-FAM-NH₂・HCl 聚焦非临床科研领域:可用于蛋白质、多肽的位点特异性标记,实现蛋白定位、相互作用追踪;用于寡核苷酸探针标记,适配荧光原位杂交(FISH)、基因芯片检测;还可用于构建生物传感器,通过荧光信号变化实现小分子、离子的高灵敏检测。其制备以 5-FAM 为原料,先经 EDC/NHS 活化羧基,再与氨基己烷反应生成氨基衍生物,最后酸化形成盐酸盐,经柱层析纯化后纯度可达 95% 以上。
储存需严格遵循 - 20℃避光、干燥条件,避免反复冻融,以保障荧光性能与反应活性。作为绿色荧光标记的 “标准试剂”,5-FAM-NH₂・HCl 凭借水溶性、高反应性与稳定荧光,成为分子生物学、化学生物学研究中不可或缺的工具,尤其适用于需水性环境的生物分子标记实验。

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