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ATTO-620-NHS,ATTO-620-N-羟基琥珀酰亚胺酯,ATTO-620-NHS Ester

2026-05-12 分享

ATTO-620-NHS是一种基于远红区荧光染料ATTO-620修饰N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯的反应型荧光探针。其激发波长为623nm,发射波长为643nm,属于远红光谱区域。外观为深红色至紫色固体粉末,分子量约850道尔顿,纯度≥90%。该化合物将ATTO系列染料的卓越光物理性能与NHS酯的氨基偶联活性完美结合,是荧光标记领域的明星试剂。

光物理性能的核心优势在于ATTO染料独有的分子设计。ATTO-620具有*高的消光系数(约120,000 M⁻¹cm⁻¹)和接近定量的荧光量子产率(约0.73),这意味着在相同浓度下,其荧光强度远超传统的Cy5或Alexa Fluor 647等染料。更关键的是,ATTO染料的荧光对pH变化不敏感,在pH 4至10范围内荧光强度几乎无衰减——这一特性使其在复杂生物环境中的信号稳定性远优于传统染料。此外,ATTO-620的光稳定性*高,在连续激光照射下荧光衰减速率仅为Cy5的1/3,特别适合长时间成像实验。

NHS酯的偶联策略使该探针可直接与蛋白质、多肽、抗体上的伯氨基(赖氨酸ε-氨基及N端氨基)反应,生成稳定的酰胺键。在pH 8.3的碳酸盐缓冲液中,偶联反应可在30分钟内完成,标记效率可达95%以上。由于NHS酯对水敏感,建议现配现用,反应溶剂以无水DMSO或无水DMF为佳。标记后的产物可通过凝胶过滤或透析去除未反应的游离染料。

在单分子荧光追踪领域,ATTO-620-NHS标记的分子因其低闪烁特性而备受青睐。研究表明,ATTO-620的荧光闪烁频率比Cy5低一个数量级,这对于需要长时间连续观测的单分子实验至关重要。在超分辨显微镜(如STED、PALM/STORM)中,ATTO-620可作为有效的荧光开关探针使用。

该染料还被广泛应用于FRET(荧光共振能量转移)实验。ATTO-620可作为FRET受体,与ATTO-550(供体)或FAM(供体)配对,构建高效的能量转移对,用于研究蛋白质构象变化、分子间距离测量等。同类型推荐包括ATTO-647N-NHS、ATTO-590-NHS、ATTO-655-Maleimide、ATTO-680-Azide、ATTO-550-COOH等,共同构成覆盖可见光至近红外区的完整ATTO荧光标记工具链。保存条件为-20℃避光干燥,避免反复冻融。

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