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AF 405 Cholera Toxin Subunit B，Alexa Fluor 405 霍乱毒素 B 亚基，CTB-AF405

2026-07-13 分享

AF 405 Cholera Toxin Subunit B，中文名称 Alexa Fluor 405 霍乱毒素 B 亚基，同义英文名称 CTB-AF405、AF405 CTB Conjugate，由重组无毒霍乱毒素 B 亚基与 AF405 蓝色荧光染料偶联而成，靶向细胞膜 GM1 神经节苷脂，专注细胞膜脂筏微区、膜转运载体、纳米颗粒胞膜吸附行为等基础膜结构研究。

霍乱毒素 B 亚基（CTB）为五聚体蛋白，五个亚基围成环形空腔，每个亚基具备独立 GM1 神经节苷脂结合口袋，无需金属离子辅助即可高特异性结合细胞膜脂筏标志性脂质 GM1；重组 CTB 完全去除毒性 A 亚基，仅保留脂质结合结构域，生物相容性优异，不会引发细胞结构损伤，适配活细胞长时间孵育标记。偶联过程选用温和氨基修饰工艺，AF405 染料均匀分布于五聚体外周，不堵塞中心脂质结合空腔，保证与 GM1 的结合亲和力不受影响。

光学性能延续 AF405 系列蓝光特征，激发 404 nm、发射 442 nm，荧光亮度均衡，光稳定性优于传统 AMCA 蓝色染料，高分辨率 Z-stack 三维层扫实验中，脂筏薄层荧光信号清晰无弥散，可精准定位纳米级脂筏微区分布。染料磺酸化结构赋予偶联物高水溶性，在含血清细胞培养液中不发生聚集，不会非特异性吸附蛋白杂质，大幅降低成像背景值。

细胞膜脂筏是该试剂核心检测靶标，脂筏为细胞膜富含胆固醇、GM1 的致密微区，是膜信号转运、囊泡出胞的关键位点。AF405 CTB 孵育细胞后，蓝色荧光点状富集区域即为脂筏分布位置，可定量统计脂筏数量、尺寸、膜表面分布密度，对比不同胆固醇含量培养基对脂筏形成的调控作用。纳米载体胞膜吸附表征场景中，脂质纳米粒、聚合物囊泡表面会竞争性结合 GM1 位点，通过探针荧光强度衰减程度，可定量测算纳米颗粒与细胞膜脂筏的结合竞争能力，优化载体表面修饰方案。

跨膜囊泡转运观测方面，结合 GM1 的 CTB 会随脂筏内吞进入胞内早期内体、高尔基体，借助延时荧光成像，可完整追踪脂筏介导的胞内转运全过程，解析膜脂质分选机制。人工脂质双层膜体外模型实验中，含 GM1 的人工膜与 AF405 CTB 孵育后，荧光光谱强度可定量膜表面 GM1 脂质摩尔占比，用于人工仿生膜配方优化。试剂避光 - 20℃保存，避免高温导致 CTB 五聚体解聚，孵育过程无需添加金属离子，操作流程简单，数据重复性强。

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