CAS 1714123-51-9 ，Biotin-Tetrazine，生物素-芳基四嗪

CAS 1714123-51-9 化合物 Biotin-Tetrazine，中文标准名生物素 - 芳基四嗪，英文别名 Tetrazine-Biotin、Biotin Aryl Tetrazine，是同时搭载生物亲和识别单元与生物正交反应单元的双功能小分子试剂，核心作用是搭建 “正交标记 - 亲和捕获” 串联实验体系，实现复杂体系中 TCO 修饰分子的特异性分离富集，区别于单一功能的四嗪或生物素试剂。分子式 C₁₉H₂₃N₇O₂S，分子量 413.5，粉红色固体，仅溶于 DMSO、DMF 等无水极性有机溶剂，水溶液中溶解度*低，实验需有机相预溶后稀释至缓冲液，-20℃避光干燥储存，四嗪杂环遇光易分解，试剂需避光操作。

分子结构分为两大独立功能模块，通过苯甲基酰胺连接桥稳定结合：一端是完整生物素双环结构，维持与链霉亲和素的高亲和力结合特性；另一端是芳基四嗪杂环，具备 IEDDA 逆电子需求狄尔斯 - 阿尔德正交反应活性，可特异性识别 TCO（反式环辛烯）修饰底物，二者互不干扰，连接桥短且刚性，避免两个功能单元发生分子内猝灭或空间拮抗。分子无亲水修饰基团，整体呈疏水性，适合有机相合成、固相萃取实验，不适合活细胞直接孵育标记。

核心使用逻辑为两步串联捕获流程：第一步利用四嗪基团与样品内 TCO 修饰蛋白、多肽发生正交反应，共价标记目标分子；第二步将反应混合液通入链霉亲和素固相树脂，依靠生物素与亲和素的特异性结合，将标记后的目标分子固定在填料上，洗涤去除未结合杂蛋白后，通过生物素竞争洗脱，完成低丰度目标分子富集分离。该串联体系规避传统直接生物素标记的非特异性结合缺陷，仅捕获预先 TCO 修饰的靶标，分离纯度提升 60% 以上，适用于细胞内低丰度蛋白复合物提取。

除蛋白分离外，该试剂用于高分子材料界面表征，TCO 改性聚酯薄膜表面孵育 Biotin-Tetrazine 后，生物素端可结合亲和素荧光探针，通过荧光强度定量薄膜表面 TCO 基团接枝密度，表征聚合物表面功能化程度。在小分子探针合成中，可作为桥连分子，连接 TCO 修饰药物分子与亲和检测体系，实现微量小分子复合物的定性定量分析。

合成采用酰胺缩合工艺，游离生物素羧酸与氨基芳基四嗪缩合，重结晶提纯去除游离生物素杂质，纯度≥97%。操作全程规避水相长时间放置，四嗪水解会丧失正交反应活性。对比 PEG 修饰四嗪生物素，无亲水链结构使其吸附于固相树脂后洗脱背景更低，是体外蛋白复合物富集、材料表面功能定量检测的专用双功能捕获试剂。

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