CF680R Streptavidin Conjugate,链霉亲和素CF680R偶联物
CF680R Streptavidin Conjugate、CF680R-Labeled Streptavidin、Streptavidin CF680R,链霉亲和素,CF680R偶联物,是一款面向近红外荧光免疫印迹场景开发的高性能荧光探针。它将近红外区的CF680R荧光染料与链霉亲和素共价偶联,利用近红外荧光低背景、高穿透的特性,大幅提升免疫印迹实验的检测灵敏度与动态范围,成为低丰度靶标蛋白定量检测的理想工具。
这款偶联物的CF680R荧光单元拥有680nm的激发峰与701nm的发射峰,处于近红外一区的低自发荧光窗口,在常规的NC膜、PVDF膜上几乎不会产生非特异性的背景荧光。相比可见光区的荧光探针,近红外信号完全避开了生物样本中杂蛋白、膜基质的自发荧光干扰,检测背景降低数倍,可轻松识别出皮克级别的低丰度靶标蛋白。链霉亲和素与生物素的超高亲和力,让偶联物可以通过生物素化二抗构建信号放大体系,进一步提升检测的灵敏度,同时大幅降低抗体的使用量。
在传统的可见光免疫印迹实验中,高背景、窄动态范围的问题一直限制着低丰度蛋白的准确定量。Streptavidin, CF680R conjugate通过优化偶联工艺,让链霉亲和素的等电点维持在中性区间,大幅减少了偶联物与膜上带负电杂蛋白的非特异性吸附,进一步压低了背景噪声。同时CF680R染料的高亮度特性,让偶联物在低浓度下依然能输出足够强的荧光信号,检测的线性动态范围可以拓宽到4个数量级,实现不同丰度靶标蛋白的同时准确定量。
在复杂样本的低丰度蛋白检测中,研究人员可先通过生物素化的一抗识别靶标蛋白,再加入生物素化的二抗,利用链霉亲和素的四价结合特性,让Streptavidin, CF680R conjugate在靶标位点形成多层级的信号放大,无需依赖化学发光的酶促反应,即可获得稳定的高信噪比近红外荧光条带。相比化学发光检测,近红外荧光检测的信号不会随时间衰减,同一张膜可多次扫描重复验证,结果的重复性大幅提升。在双向电泳的全蛋白图谱定量分析中,这款偶联物可用于标记生物素化的全蛋白样本,通过近红外扫描获得背景*低的全蛋白荧光图谱,精准识别出传统染色方法容易遗漏的低丰度蛋白点,为蛋白质组的差异表达分析提供更全面的数据。在核酸杂交检测中,它可与生物素化的核酸探针结合,实现核酸条带的高灵敏度近红外荧光检测,避开核酸凝胶的自发荧光干扰,获得更清晰的核酸条带成像结果。
使用该偶联物进行免疫印迹实验时,建议采用封闭液提前对膜进行充分封闭,孵育过程中保持缓慢摇动,让偶联物与靶标位点充分结合,扫描时选择对应近红外通道的成像设备,即可获得高质量的检测结果。未使用完的试剂需置于-20℃避光密封保存,避免反复冻融。

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