AZDye 488 四嗪,AZDye 488-Tetrazine,AZDye 488 Methyltetrazine
AZDye 488 四嗪,英文别名包括AZDye 488-Tetrazine、AZDye 488 Methyltetrazine、AZDye 488 Tetrazine Conjugate。该探针*大激发波长约488nm,完美匹配普通共聚焦显微镜的488nm氩离子激光通道,荧光量子产率接近0.9,光稳定性远超传统FITC荧光染料,分子上的四嗪反应基团可与TCO修饰的目标分子在数秒内完成特异性偶联,标记反应的特异性接近100%。
传统单分子追踪实验中,常用的荧光蛋白标记方法存在成熟时间长、亮度低的缺陷,很难实现对快速运动的单分子的长时间连续追踪。而AZDye 488 四嗪作为有机小分子荧光探针,亮度是普通绿色荧光蛋白的3倍以上,光漂白半衰期更长,通过基因编码非天然氨基酸技术,将带有TCO侧链的非天然氨基酸精准插入目标蛋白的特定位点,再用AZDye 488 四嗪进行点击标记,即可在活细胞内实现对单个目标蛋白的高亮度、长时程动态追踪,观测到传统荧光蛋白标记无法捕捉的毫秒级快速运动过程。
在科研场景中,该探针常被用于活细胞内单分子动力学研究,通过精准标记细胞膜上的单个转运蛋白、信号分子,长时间追踪其在细胞膜表面的扩散、聚集与相互作用过程,获取单分子层面的运动参数,为揭示细胞内信号转导的微观机制提供直接的实验数据支撑,大幅提升单分子成像实验的时间分辨率与数据可靠性。

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