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Agarose‑DSL，琼脂糖偶联曼陀罗凝集素， ## Agarose‑DSL，琼脂糖偶联曼陀罗凝集素，

2026-09-11 分享

Agarose‑DSL，中文名称琼脂糖偶联曼陀罗凝集素，是将曼陀罗凝集素（DSL）共价固定于琼脂糖微球基质制备而成的固相亲和层析介质，核心用于糖蛋白、糖肽及多聚N-乙酰葡糖胺寡糖的亲和捕获与分离纯化，属于糖组学样品前处理的固相载体材料。曼陀罗凝集素提取自曼陀罗种子，属于壳多糖结合型凝集素，偏好识别β-1,4糖苷键连接的N-乙酰氨基葡萄糖寡聚结构，对壳二糖、壳三糖以及重复N-乙酰乳糖胺序列具有较高亲和能力，单体蛋白由两条多肽链依靠二硫键组装形成，具备稳定的糖识别口袋，在合适pH区间内可维持糖结合活性。琼脂糖微球作为固相支撑骨架，拥有丰富的孔隙结构，比表面积充足，可容纳大分子糖缀合物进入微球内部完成特异性结合，基质理化稳定性强，耐受常规层析缓冲液，在pH3至pH11区间都能保持凝胶骨架完整，不易发生基质裂解与蛋白非特异性吸附。

该介质制备过程采用温和共价偶联工艺，*大限度保留DSL天然构象，同时降低凝集素在层析洗脱过程中的泄漏问题。在层析实验中，样本上样后，含β-1,4-N-乙酰葡糖胺寡糖的糖蛋白会被特异性捕获，杂蛋白随流动相流出；后续可使用游离N-乙酰氨基葡萄糖寡糖作为竞争洗脱剂，温和释放目标糖缀合物，避免强变性条件破坏糖链结构，*大程度保留糖链原始修饰信息。对比游离凝集素探针，固相偶联形式的Agarose‑DSL可装填于层析柱，实现批量样本的富集，还能够重复再生使用，大幅降低糖组学富集实验的试剂成本，适合大规模样本的糖蛋白分离。

使用时需要预先用中性缓冲液充分洗涤介质，去除储存体系中的防腐剂，防止防腐剂干扰糖结合。该介质严禁冷冻保存，低温结冰会破坏琼脂糖微球孔隙结构，造成基质破碎，降低柱效；推荐2-8℃避光保存。实验设计中需要设置空白琼脂糖对照柱，用来扣除基质本身带来的非特异性吸附信号，区分真实亲和捕获产物。该介质广泛应用于糖蛋白组学富集、寡糖分离、糖缀合物初步分级，为后续质谱解析、糖链结构鉴定提供纯化后的样品，是糖组学样品前处理环节不可或缺的固相亲和工具。

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