CF594‑Con A,CF594 标记刀豆球蛋白 A,Concanavalin A CF594 conjugate
CF594‑Con A,中文名称 CF594 标记刀豆球蛋白 A,英文别名 Concanavalin A CF594 conjugate、CF594-Concanavalin A、CF594 labeled Con A,是 CF594 深红色荧光染料与刀豆球蛋白 A 共价偶联制备的糖链识别探针,拥有高量子产率、超高亮度特性,适合共聚焦显微镜、单分子荧光成像、STED 超分辨成像等需要高信号强度的显微实验,用于细胞与组织样本中甘露糖、葡萄糖型糖缀合物的定位标记。刀豆球蛋白 A 来源于刀豆种子,四聚体形态下拥有四个独立糖结合位点,依靠 Ca²⁺、Mn²⁺维持空间构象,特异性识别 α-D - 甘露吡喃糖残基与 α-D - 葡萄糖吡喃糖残基,是糖生物学研究中应用广泛的凝集素。CF594 染料激发峰值 593 nm,发射峰值 614 nm,摩尔消光系数 115000 M⁻¹cm⁻¹,可适配 532 nm、561 nm、594 nm 激光器,亮度优于同光谱区间传统染料,水溶性出色,蛋白偶联之后荧光量子产率维持在较高水平。
单分子成像与 STED 超分辨成像对探针荧光亮度要求高,低亮度探针信号容易被噪声淹没,无法分辨纳米尺度糖链分布细节。CF594 染料本身高亮度特性,偶联凝集素之后依旧保留优秀荧光输出能力,在激光激发下可以产生强荧光信号,能够捕捉细胞表面糖蛋白纳米尺度分布特征,实现超分辨图像采集。同时 CF594 光稳定性良好,耐受重复激光扫描,在多层共聚焦 Z-stack 三维堆叠成像过程中,荧光信号衰减速度慢,利于完成厚样本三维重构,完整还原细胞、组织内部糖缀合物空间分布。染料水溶性佳,偶联后探针在水相缓冲液中分散均匀,不容易发生分子聚集,减少聚集引发的荧光淬灭。
CF594‑Con A 的深红色荧光通道和绿色荧光探针光谱分离效果好,和 CF488A 标记凝集素搭配进行双色成像时,荧光溢漏程度低,两个通道信号相互干扰小,可同时标记两种不同糖链结构,实现共定位分析。探针适用范围广泛,固定细胞免疫荧光染色、组织切片原位糖链标记、酵母与真菌细胞壁多糖染色均可使用,也可用于凝胶糖蛋白染色、流式细胞术红通道定量检测。在细胞生物学研究中,该探针可用来观察细胞分化过程细胞膜糖萼结构变化;微生物方向用来追踪真菌菌丝壁甘露聚糖分布;组织样本中标记细胞外基质糖蛋白,揭示组织微环境糖链分布特征。
探针使用体系必须保证充足钙离子与锰离子,金属离子缺失会直接导致凝集素构象坍塌,丧失糖链识别能力。样本固定条件需要温和,强氧化剂类固定试剂会破坏糖链结构,降低探针结合效率。成像实验中激光功率需要合理调控,高亮度探针在较低激光功率下即可获得充足信号,降低激光对样本的光损伤,保护细胞细微结构。对比 CF633、CF640R 远红标记凝集素,CF594‑Con A 处于深红波段,很多常规共聚焦设备标配 594 nm 激光,设备兼容性更强,不需要远红外专用光学配件,在普通多色成像平台即可开展实验。
超分辨显微技术不断普及,纳米尺度糖链可视化研究需求持续增长,高亮度荧光凝集素探针成为重要工具。CF594‑Con A 结合刀豆球蛋白 A 特异性糖识别能力和 CF594 高亮度、高光稳定性优势,为共聚焦三维成像、STED 超分辨成像、单分子荧光观测提供高性能标记方案,助力细胞膜糖蛋白、真菌细胞壁多糖、组织糖组学等方向的精细研究。

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