CF488A-PNA,CF488A 标记花生凝集素,CF488A-Peanut Agglutinin
CF488A-PNA,CF488A 标记花生凝集素,别名 CF488A-Peanut Agglutinin、CF488A Green Fluorescent Lectin。这款绿色荧光标记的探针,量子产率接近0.9,大激发波长490 nm,发射峰值位于515 nm,与常规FITC的滤光片组完全适配,但抗光漂白性能相比传统FITC标记物提升数倍,完全可以满足长时间高分辨率共聚焦成像的需求。探针每个凝集素分子仅偶联1-2个荧光基团,在保证足够荧光亮度的同时,大程度保留了天然凝集素的糖结合活性,避免了过度标记导致的蛋白构象改变与结合能力下降问题。
在糖蛋白电泳凝胶的原位示踪实验中,该探针可直接对电泳分离后的糖蛋白条带进行特异性染色,无需进行复杂的转膜操作,就能直观显示出凝胶中不同分子量糖蛋白的分布与含量,相比传统的蛋白染色方法,它可以特异性区分糖基化修饰蛋白与非糖基化蛋白,大幅提升糖蛋白检测的特异性与灵敏度。在植物叶表皮细胞的细胞壁糖结构分布观测中,该探针还能清晰标记出气孔保卫细胞表面的特征糖链结构,结合扫描共聚焦显微镜的高分辨率成像,可直观展示不同胁迫处理下保卫细胞糖基化修饰的变化规律。
实验操作时,电泳后的凝胶经适当固定后,加入用TBST缓冲液稀释至10-25 μg/mL的探针工作液,室温避光孵育30-60分钟,之后用TBST缓冲液多次漂洗去除未结合的游离探针,即可置于凝胶成像系统下采集荧光信号。针对组织切片样本,可适当降低探针工作浓度至5-15 μg/mL,减少非特异性吸附带来的背景干扰,获得更加清晰的成像结果。

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