APDye594-Picolyl Azide，APDye594-吡啶甲基叠氮的应用

APDye594-Picolyl Azide，中文名称APDye594-吡啶甲基叠氮，是一类集荧光发色团与吡啶甲基叠氮反应基团于一体的功能性荧光分子，分子同时具备可被光激发的荧光响应能力与高选择性生物正交反应活性，在生物分子标记、原位荧光成像领域具备独特应用潜力。APDye594荧光母核拥有594 nm附近的激发波长，发射光谱位于610 nm区间，荧光亮度高，抗光漂白性能突出，相比同波段传统荧光染料，在长时间连续成像过程中，荧光信号衰减速率更慢，能够支持长时间动态观测实验。

吡啶甲基叠氮是该分子核心反应位点，该基团可以在特定金属催化条件下发生高效的点击化学反应，与炔基修饰的目标分子发生定点偶联。吡啶环的引入可以调节叠氮基团的反应活性，提升催化反应效率，降低非特异性结合带来的背景信号。分子整体结构经过优化设计，荧光发色团与反应基团之间引入分隔连接链，避免反应过程中发色团电子环境受到干扰，防止偶联完成后荧光量子产率出现明显下降。分子水溶性经过调控，在水相缓冲体系中能够稳定溶解，适配水相生物标记体系，无需添加大量有机助溶剂，减少有机组分对生物大分子构象的扰动。

该分子主要应用于生物大分子原位标记工作，可对带有炔基修饰的多糖、蛋白、核酸分子进行荧光标记，标记完成后利用荧光成像手段观测目标分子空间分布。在多色成像实验中，该染料的光谱窗口可以和Cy3、Cy5系列荧光染料实现有效光谱分离，光谱串色干扰小，支持多靶点同步成像分析。同时该分子可用于体外固相载体表面分子修饰，在微球、芯片表面实现目标分子的荧光功能化修饰，构建荧光传感检测体系。样品配制操作需要避光，反应体系pH控制在中性区间可以*大化保留反应活性，长期保存需置于低温避光环境，防止叠氮官能团发生分解失效。

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